[发明专利]GLP-1类似物Fc融合多肽及其应用

说明书

本发明公开了一种GLP‑1类似物Fc融合多肽及其应用，以用于解决传统的GLP‑1类似物生物半衰期短的问题。该GLP‑1类似物Fc融合多肽中GLP‑1类似物相对于野生型的GLP‑1(7‑37)序列有两个位点的突变，其中第8位的丙氨酸突变为甘氨酸，可以避免二肽基肽酶‑IV(DPP‑IV)的酶切，第22位甘氨酸突变为谷氨酸，可以增强了GLP‑1生物活性；人IgG2 Fc突变体主要有3个位点的突变，降低了ADCC和ADCP效应，并增加了与FcRn的亲和力，有利于延长半衰期。经过实验验证，该GLP‑1类似物Fc融合多肽的体外活性高、且生物半衰期较目前的现有产品显著延长。该GLP‑1类似物Fc融合多肽可应用于降血糖、治疗糖尿病和瘦身减肥的药物或保健品的研发中。

技术领域

本发明涉及融合蛋白领域，尤其是涉及一种GLP-1类似物Fc融合多肽及其应用。

背景技术

胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1，GLP-1)是一种胃肠多肽激素，主要由人三种组织分泌：肠道末端的L细胞、胰腺的α细胞和中枢神经系统(CNS)。GLP-1对血糖调节的作用主要包括：促进胰岛素合成和分泌、延缓胃排空、诱发饱腹感、抑制胰高血糖素分泌和促进胰腺β细胞再生等。GLP-1是一种安全的降糖药物，没有低血糖风险，且能明显减轻体重。但是，天然的GLP-1的半衰期只有2-3分钟，容易被二肽基肽酶(DPP-IV)降解，因此限制了GLP-1多肽作为药物用于治疗糖尿病的有效性。由诺和诺德公司研发的利拉鲁肽是GLP-1的类似物，通过对GLP-1的一个氨基酸进行更换，并增加一个短的脂肪酸侧链制成，与内源性GLP-1有97％的同源性，具有改善糖化血红蛋白(HbA1c)控制、减轻体重、降低心脏收缩压(SBP)、加强β细胞功能等功效以及其他一些次级功效。因此，利拉鲁肽从理论上有可能延缓糖尿病病程的发展，但仍需每日注射1次。由礼来(Eli Lilly)公司开发的IgG4Fc融合的GLP-1类似物—度拉鲁肽是将GLP-1类似物通过连接肽(linker)融合到重组IgG4Fc片段的N端，体内的平均生物半衰期长达90小时，可以实现每周给药一次，一定程度上提高了患者的依从性。

发明内容

基于此，本发明提供了一种GLP-1类似物Fc融合多肽及其应用，以用于解决传统的GLP-1类似物生物半衰期短的问题。

一种GLP-1类似物Fc融合多肽，结构为：(X-linker)_n-Y；其中，X为GPL-1类似物，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；linker为连接肽；n＝1或2；Y为人IgG2Fc突变体。

在其中一个实施例中，linker的序列为(GGGGS)_m，1≤m≤6且m为整数。

在其中一个实施例中，m＝3。

在其中一个实施例中，n＝2。

在其中一个实施例中，所述人IgG2Fc突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

上述任一实施例所述的GLP-1类似物Fc融合多肽在制备用于治疗糖尿病的药物或降血糖药物中的应用。

上述任一实施例所述的GLP-1类似物Fc融合多肽在制备用于减肥的保健品中的应用。

上述人IgG2Fc突变体具有降低ADCC(Antibody-dependent cellularcytotoxicity，抗体依赖的细胞毒性)和ADCP(Antibody-dependent cellularphagocytosis，抗体依赖的细胞吞噬)活性和增加与FcRn(neonatal Fc receptor，新生Fc受体)亲和力的功能，相对于野生型人IgG2Fc，该突变体主要有3个位点的突变，将第234位(由EU编号体系确定的位置)的缬氨酸(V)突变为丙氨酸(A)，将第237位的甘氨酸(G)突变为丙氨酸(A)，这两个位点的突变降低了ADCC和ADCP效应；将第434位的谷氨酰胺(N)突变为丝氨酸(S)，增加了与FcRn的亲和力，从而进一步延长半衰期。