[发明专利]检测冠状动脉硬化相关单核苷酸多态性位点的引物和方法

说明书

本发明提供了检测与冠状动脉粥样硬化显著相关的易感区域chr9p21单核苷酸多态性位点的引物和方法。检测的单核苷酸多态性位点是位于染色体9p21上的rs1333049、rs2383206、rs10757278、rs2383207、rs10757274。根据本发明染色体9p21上一系列SNP位点的突变情况，可以提供冠状动脉硬化临床预测、诊断和预后评估，并为患者提供个性化治疗策略以及风险预测，降低冠心病与心肌梗死的发病率。

技术领域

本发明属于医学及生物技术领域，特别涉及一种使用PCR及Sanger测序法检测与冠状动脉硬化相关的单核苷酸多态性位点突变的引物和方法。

技术背景

冠心病(coronary artery disease，CAD)是发达国家排名第一的死亡原因，也即将成为发展中国家健康的头号杀手。目前，冠心病被认为是一种由遗传因素和环境因素共同作用而发病的多基因遗传性疾病，然而，只有少数与冠心病相关的遗传因素得到了确定。近年来，大规模单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)相关性研究已成为阐明疾病发病机制的重要研究手段之一。最近，利用成百上千个标志物或者重点相关基因的重新测序的全基因组相关研究(genome-wide association studies，GWAS)促进了冠心病的易患基因研究。近年来，GWAS研究发现，冠心病相关易感基因位于染色体9p21上，并且相继在不同的研究人群中得到印证，为冠心病遗传研究提供新的证据，引起了各国研究者的广泛关注。因此鉴定出与冠心病相关的易感基因或致病基因，在人群中进一步筛选增加疾病风险的易感基因确定易感个体，将有助于冠心病的发病风险预测、新药开发、诊断和个体化治疗。从基础到临床，人们对此进行了大量的研究，并在冠心病的危险因素和冠心病发生的病理生理学方面积累了大量的知识，但是关于冠心病与心肌梗死的确切遗传分子机制却知之甚少，对于怎样鉴定遗传易感基因以及鉴定受试者的冠心病遗传易感性，一直缺乏全面系统有效的识别方法。

发明内容

本发明的目的是针对上述现有技术的不足，提供与冠状动脉硬化关联最显著的代表性单核苷酸多态性位点，继而通过单核苷酸多态位点突变情况用于评估冠心病易感性的用途。所述检测与冠状动脉硬化相关单核苷酸多态性的引物，包括：

扩增单核苷酸多态性位点的引物，其碱基序列为：

rs1333049-F 5’-TGTAAAACGACGGCCAGTAGATCATACCCGAAGTAGAGCTG-3’

rs1333049-R 5’-AACAGCTATGACCATGTTGTCCAATTTACATTTCCTTCAC-3

rs2383206-F 5’-TGTAAAACGACGGCCAGTCAAGAGCCATGTCATTGAAAGAG-3’

rs2383206-R 5’-AACAGCTATGACCATGAGCCTAACTTTAAGCCACCAAG-3

rs10757278-F 5’-TGTAAAACGACGGCCAGTGGGCATTAAGAAAGGGATGG-3’

rs10757278-R 5’-AACAGCTATGACCATGGCTAGACTCCACGCTGTTCC-3’

rs2383207-F 5’-TGTAAAACGACGGCCAGTGGGGATTATTGGTGGTTTTCTA-3’

rs2383207-R 5’-AACAGCTATGACCATGTCATGGGGAGTACAGACTACCTT-3

rs10757274-F 5’-TGTAAAACGACGGCCAGTTCTTGTTGAATTGATCCCTTACC-3’