[发明专利]一种胰岛素DesB30的制备方法有效
| 申请号： | 201910002001.2 | 申请日： | 2019-01-02 |
| 公开（公告）号： | CN109735589B | 公开（公告）日： | 2020-07-10 |
| 发明（设计）人： | 姚元锋;张超;刘本达;马文柱;夏玉平;赖红星;肖拥军;罗湘冀 | 申请（专利权）人： | 珠海冀百康生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K14/62;C07K1/30 |
| 代理公司： | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人： | 刘先荣 |
| 地址： | 519000 广东省珠海市金湾区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 胰岛素 desb30 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种胰岛素DesB30的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、向胰岛素前体蛋白的发酵液中添加蛋白酶；
S2、调节步骤S1处理后的溶液的pH值和温度使蛋白酶进行酶切，酶切后得到含有胰岛素DesB30的溶液；
所述蛋白酶为赖氨酸酰肽链内切酶；所述赖氨酸酰肽链内切酶的用量为0.5～5U/g胰岛素前体蛋白；
步骤S2中，所述pH值为8.0～10.0，所述温度为15～37℃，所述酶切的反应时间为15-20h。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述赖氨酸酰肽链内切酶的用量为0.5～4U/g胰岛素前体蛋白。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤S2中所述pH值为9.0～10.0。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤S2中，所述温度为20～37℃。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤S2中，所述温度为25-37℃。
6.根据权利要求1-5任一项所述的胰岛素DesB30的制备方法，其特征在于：所述制备方法还包括步骤S3、对酶切后的含有胰岛素DesB30的溶液进行等电点沉淀回收操作，得到纯度更高的胰岛素DesB30。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述等电点沉淀回收操作是在4℃下反应10h。
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