[发明专利]李斯特菌噬菌体组合物及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，一种噬菌体组合物，其特征在于：所述的组合物包括：单核细胞增生性李斯特菌噬菌体CCTCC NO：M 2010003、单核细胞增生性李斯特噬菌体CCTCC NO：M 2018644及单核细胞增生性李斯特噬菌体CCTCC NO：M 2018645；该噬菌体组合物，其作用宿主范围更广，效率更高，在作用3h即可有效抑制宿主生长，其相对单一噬菌体在实际环境中应用效果更佳。

技术领域

本发明涉及李斯特菌噬菌体菌株及其混合物作为食品添加成分在固态及液态食品中的应用，尤其是能够特异性裂解食品中污染的多种李斯特菌的噬菌体混合物的应用。属于生物工程领域。

背景技术

李斯特菌(Listeria)是一种能够引起动物和人李斯特菌病的革兰氏阳性细菌，其中单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是最重要的食源性人兽共患病原，感染后主要表现为胃肠炎、败血症、脑膜脑炎和流产等，死亡率高达25-30％。在自然界中，Lm通常存在于土壤、河水、植物、屠宰场废弃物及动物源食品中(肉、奶及其制品、海产品等)，且在低温环境中仍可生长繁殖(如2～8℃)，是冷藏食品以及即食(Ready-To-Eat,RTE)食品中威胁人类健康的重要病原菌之一。国内主要城市食品污染调查研究显示，北京8类食品中，Lm平均检出率为21.5％；河南省熟肉制品中检出率为16.98％；威海市12类产品中检出率达9.09％。在国外，美国和加拿大曾爆发过6起重大的李斯特菌病，而这都与食用了污染李斯特菌的食品有关。

噬菌体是一类细菌依赖性的病毒，又称细菌病毒。具有裂解性的噬菌体能够感染细菌并在细菌体内快速增殖，使之裂解。Lm噬菌体可以特异性感染并裂解Lm，因而具有杀菌作用。在食品尤其是即食性食品中，噬菌体能够作为加工助剂或添加成分来控制Lm污染，减少化学杀菌防腐剂的使用，保障食品安全、绿色，具有良好的开发和应用价值。

噬菌体能够有效抑制单核细胞增生性李斯特菌，但由于其特异性，从而在实际应用中出现抑制效率不完全等特点，因此，通过李斯特菌噬菌体作用宿主范围的差异进行组合，能够有效提高噬菌体的裂菌效率，从而解决实际应用过程中抑制不完全等现状，有效控制食源性单核细胞增生性李斯特菌的污染。

发明内容

本发明的目的在于：开发对李斯特菌具有强裂解作用的噬菌体制剂，该制剂可以单独或复配使用，能够特异性的灭活多种食源性李斯特菌，为目前防控食品中李斯特菌污染提供一种安全、无毒副作用的噬菌体产品来源。

本发明的目的是这样实现的：一种噬菌体组合物，其特征在于：所述的组合物包括：单核细胞增生性李斯特菌噬菌体CCTCC NO：M 2010003、单核细胞增生性李斯特噬菌体CCTCC NO：M 2018644及单核细胞增生性李斯特噬菌体CCTCC NO：M 2018645，对单核细胞增生性李斯特菌具有实质性裂解作用。

所述的一种噬菌体组合物，其特征在于所述的单核细胞增生性李斯特菌噬菌体CCTCC NO：M 2010003、单核细胞增生性李斯特噬菌体CCTCC NO：M 2018644)和单核细胞增生性李斯特噬菌体CCTCC NO：M 2018645，按体积比1:1:1混合而成。

所述的噬菌体组合物在制备作为李斯特菌抑制剂中的应用。

所述噬菌体组合物的培养物作为李斯特菌抑制剂中的应用。

所述的应用指的是将噬菌体组合物制成喷洒液或淋洗液，用于对食品、食品生产环境或生产器具的喷洒或消杀，防止食品加工过程中造成的李斯特菌污染。

所述的食品，由肉类，或蛋类，或奶制品，或粮食，或蔬菜，或它们之间的组合加工的固体或液体类食品。

将纯化的噬菌体组合物或噬菌体的培养物与赋形剂复配后作为李斯特菌的抑制剂的应用。

所述的赋形剂为制药领域普遍使用的缓冲液、金属离子、表面活性剂、明胶、海藻酸盐。