[发明专利]用于T细胞活化和扩增以用于免疫疗法的三维生物反应器

权利要求书

1.一种用于T细胞扩增的方法，其包括：

提供3D生物反应器，所述3D生物反应器包含具有用于细胞扩增的表面区域的多个空隙，所述多个空隙具有直径D，在所述空隙之间的多个孔开口具有直径d，使得Dd，并且其中：(a)90％或更多的所述空隙具有变化不超过+/-10.0％的所选空隙体积(V)；并且(b)所述空隙之间的90％或更多的所述孔开口具有变化不超过+/-10.0％的d值；

提供在所述生物反应器的用于细胞扩增的表面区域上的聚多巴胺涂层；

提供附着于所述聚多巴胺涂层的四聚体蛋白；

提供固定在所述四聚体蛋白上的一种或多种生物素化抗体；

使T细胞流过具有T细胞受体的所述生物反应器并被活化，其中所述T细胞受体与所述一种或多种生物素化抗体结合；

将活化的T细胞暴露于含有信号传导分子的灌注培养基中以促进T细胞扩增。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述四聚体蛋白包括抗生物素蛋白或链霉抗生物素蛋白。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述生物素化抗体包括抗CD3抗体。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述生物素化抗体包括抗CD3抗体和抗CD28抗体。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述生物素化抗体包括抗CD3抗体、抗CD28抗体和抗CD2抗体。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述信号传导分子包括细胞因子信号传导分子。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述空隙的直径(D)大于0.4mm，并且所述孔的直径(d)大于0.20mm。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述空隙的直径(D)在大于0.4mm至100.0mm的范围内。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述孔的直径(d)在0.2mm至10.0mm的范围内。

10.根据权利要求1所述的方法，其中95.0％或更多的所述空隙指示变化不超过+/-10.0％的空隙体积(V)。

11.根据权利要求1所述的方法，其中99.0％至100％的所述空隙指示变化不超过+/-10.0％的空隙体积(V)。

12.根据权利要求1所述的方法，其中在所述空隙之间的95.0％或更多的所述孔开口具有变化不超过+/-10.0％的d值。

13.根据权利要求1所述的方法，其中在所述空隙之间的99.0至100％或更多的所述孔开口具有变化不超过+/-10.0％的d值。

14.根据权利要求1所述的方法，其中存在的至少90.0％的空隙每个空隙具有2个孔开口。

15.根据权利要求1所述的方法，其中存在的至少90.0％的空隙每个空隙具有8至12个孔开口。

16.根据权利要求1所述的方法，其中所述空隙具有内部凹面。

17.根据权利要求1所述的方法，其中所述空隙包含球形空隙。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述球形空隙在3D圆柱形空间中具有大于64.0％的填充效率。

19.根据权利要求1所述的方法，其中所述3D生物反应器由具有至少0.01GPa的拉伸模量的材料形成。

20.根据权利要求1所述的方法，其中所述3D生物反应器由生物相容的材料形成。