[发明专利]腺相关病毒变体衣壳和用于抑制血管生成的应用

权利要求书

1.一种重组腺相关病毒(rAAV)病毒粒子，其包含(a)变体腺相关病毒(AAV)衣壳蛋白，所述变体腺相关病毒(AAV)衣壳蛋白相对于相应的亲本AAV衣壳蛋白包含在所述衣壳蛋白的GH环中的肽插入，其中所述肽插入包含氨基酸序列ISDQTKH(SEQ ID NO:14)，和(b)异源核酸，其包含编码抑制血管内皮生长因子(VEGF)的活性的多肽的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列选自由下述组成的组：

(i)SEQ ID NO:69(sc-雷珠单抗-LH1)所示的核苷酸序列，

(ii)SEQ ID NO:65(阿柏西普)所示的核苷酸序列，

(iii)SEQ ID NO:74(溴珠单抗)所示的核苷酸序列，

(iv)SEQ ID NO:67(sc-雷珠单抗-HL)所示的核苷酸序列，

(v)SEQ ID NO:70(sc-雷珠单抗-LH2)所示的核苷酸序列，

(vi)SEQ ID NO:72(sc-雷珠单抗-LH-Fc)所示的核苷酸序列，

(vii)SEQ ID NO:76(溴珠单抗-Fc)所示的核苷酸序列，和

(viii)与(i)-(vii)中任一个具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％同一性的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的rAAV，其中所述肽插入包含氨基酸序列Y₁Y₂ISDQTKHY₃，其中Y₁-Y₃中的每一个独立地选自Ala、Leu、Gly、Ser、Thr和Pro。

3.根据权利要求2所述的rAAV，其中所述肽插入包含氨基酸序列LAISDQTKHA(SEQ IDNO:28)。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的rAAV，其中插入位点位于对应于AAV2的VP1(SEQID NO:2)的氨基酸587和588的氨基酸之间或在另一AAV血清型的衣壳蛋白中的相应位置。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的rAAV，其中所述衣壳蛋白包含相对于AAV2的VP1衣壳(SEQ ID NO:2)的一个或多个氨基酸取代或在另一AAV血清型中的一个或多个相应取代。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的rAAV，其中所述衣壳蛋白包含相对于AAV2的VP1衣壳(SEQ ID NO:2)的P34A氨基酸取代或在另一AAV血清型中的相应取代。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的rAAV，其中所述衣壳蛋白包含(i)氨基酸序列ISDQTKH(SEQ ID NO:14)和(ii)P34A氨基酸取代，并且与SEQ ID NO:42所示的序列具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少99％同一性。

8.根据权利要求7所述的rAAV，其中所述衣壳蛋白基本上由SEQ ID NO:42所示的氨基酸序列组成。

9.根据权利要求8所述的rAAV，其中所述核苷酸序列与SEQ ID NO:69(sc-雷珠单抗LH)所示的序列的全长或与SEQ ID NO:69的核苷酸61-1578具有至少90％同一性、至少95％同一性、至少98％同一性、至少99％同一性或100％同一性，并且编码SEQ ID NO:71所示的氨基酸序列或编码SEQ ID NO:71的氨基酸21-525的氨基酸序列。

10.根据权利要求9所述的rAAV，其中所述核苷酸序列包含SEQ ID NO:69的核苷酸61-1578，并且优选包含SEQ ID NO:69的核苷酸1-1578。