[发明专利]用于制备癌症干细胞球状体的方法

说明书

本发明涉及一种用于制备癌症干细胞球状体的方法或试剂盒以及利用制备的癌症干细胞球状体筛选癌细胞抗性治疗药物的方法。癌症干细胞球状体可以以简单的方式制备，制备的癌症干细胞球状体可以有效地用于筛选癌细胞抗性治疗药物。

技术领域

本发明涉及一种用于产生癌症干细胞球状体的方法或试剂盒。另外，本发明涉及一种使用通过该方法或试剂盒制备的癌症干细胞球状体筛选用于治疗癌细胞抗性的药物的方法。

背景技术

癌症干细胞(CSC或肿瘤起始细胞：TIC)具有许多与正常干细胞相似的特征，诸如自再生能力、内源性抗药性和分化等。自从已经在急性髓性白血病中发现了与干细胞相似的癌细胞以后，越来越多的证据表明，少量的癌症干细胞存在于主要造成肿瘤复发和抗药性的肿瘤聚集体中。因此，癌症干细胞在癌症研究和抗药性领域中引起了相当大的关注。

通常基于癌症干细胞表面标记物从患者来源的肿瘤组织分离癌症干细胞。然而，患者来源的肿瘤组织的供应有限，仅可以分离出少量的癌症干细胞，这使得癌症干细胞难以获得。可选地，已经尝试从现有的癌细胞系分离癌症干细胞，但是由于癌细胞系中包含少于1％至2％的癌症干细胞，因此确保足够量的癌症干细胞(Cell144，646-674(2011))是不实际的。另外，由于癌细胞的三维结构可以比二维单层结构好地代表肿瘤环境，因此目前对开发用于促进癌细胞的形成的方法显示出了相当大的兴趣。用于药物筛选或功效测试的球状体目前是通过用于将细胞插入到亲水性ULA(超低附着)表面的孔、凹琼脂糖凝胶(U-底，U-bottom)或悬滴细胞基底等中的方法产生的。然而，即使通过该方法产生的球状体也不能充分地包含癌症干细胞。在这种情况下，需要开发用于在人癌细胞系中产生具有癌症形成能力的癌症干细胞球状体的简单方法。

因此，本发明人已经尝试开发用于产生癌症干细胞球状体的方法，结果，他们已经建立了用于使用包括环硅氧烷聚合物的细胞培养基底和包括白蛋白的培养基产生癌症干细胞球状体的方法，从而完成了本发明。

发明内容

【技术问题】

本发明的一个目的在于提供一种用于从癌细胞诱导癌症干细胞的组合物，该组合物包括白蛋白和用于细胞培养的培养基。

本发明的另一目的在于提供一种从癌细胞产生癌症干细胞的方法，该方法包括使用用于从癌细胞诱导癌症干细胞的组合物培养癌细胞的步骤，该组合物包括包含白蛋白的培养基。

本发明的另一目的在于提供一种用于产生癌症干细胞球状体的试剂盒，该试剂盒包括用于从癌细胞诱导癌症干细胞的组合物，该组合物包括白蛋白和用于细胞培养的培养基，其中，细胞培养基底包括环硅氧烷聚合物，培养基包括白蛋白。

本发明的另一目的在于提供用于治疗癌细胞抗性的药物的筛选，包括：(a)通过产生癌症干细胞球状体的方法制备癌症干细胞球状体；(b)使用于治疗癌细胞抗性的候选物质对(a)步骤的癌症干细胞球状体进行治疗；以及(c)将其中用(b)步骤的用于治疗癌细胞抗性的候选物质治疗的癌症干细胞球状体组与其中未被用于治疗癌细胞抗性的候选物质治疗的对照组比较。

【技术方案】

具体地描述如下。同时，本申请中公开的每个描述和实施例可以应用于每个其它的描述和实施例。换句话说，本申请中公开的各种元素的所有组合落入本申请的范围内。另外，本申请的范围不被认为由下面公开的具体描述限制。

作为实现本发明的目的的一个方面，提供了一种用于从癌细胞诱导癌症干细胞的组合物，该组合物包括包含白蛋白的用于细胞培养的培养基。

作为实现本发明的目的的另一方面，提供了一种用于从癌细胞制备癌症干细胞的方法，该方法包括使用用于从癌细胞诱导癌症干细胞的组合物培养癌细胞，该组合物包括包含白蛋白的用于细胞培养的培养基。