[发明专利]细胞聚集促进剂

说明书

本发明的目的在于提供适当控制细胞聚集体的大小而不依赖于机械性/物理性方式的方法，具体而言，本发明涉及包含SRF抑制剂的用于细胞的悬浮培养的细胞聚集促进剂。另外，本发明涉及包括在包含SRF抑制剂的培养基中对细胞进行悬浮培养的工序的细胞聚集体的制备方法。

技术领域

本发明涉及细胞聚集促进剂。另外，本发明涉及细胞聚集体的制备方法、以及利用该方法制备的细胞聚集体。另外，本发明涉及细胞培养组合物。

背景技术

随着近年来对人ES细胞、人iPS细胞等人多能干细胞的研究，再生医学实用化的可能性不断增高。这些细胞具有能够无限增殖的能力、和分化成各种细胞的能力，因此，使用了多能干细胞的再生医学有望从根本上改变对难治性疾病、生活方式病等的治疗方法。已经可以在试验管内由多能干细胞分化诱导以神经细胞为代表的心肌细胞、血液细胞、以及视网膜细胞等各个种类的细胞。

与使用多能干细胞对各种器官进行再生的再生医学相关的实用化所面临的课题之一是如何高效率地生产器官再生所需要的大量细胞。例如，肝脏的再生需要约2×10¹¹个细胞。为了通过平坦的基板上的贴壁培养对上述个数的细胞进行培养，需要约10⁶cm²以上的基板，这相当于约20000个通常的10cm培养皿。由于通过基板表面上的贴壁培养而得到的细胞数依赖于培养面积，因此难以扩大规模，难以供给再生医学所需要的足够量的细胞。

因此，由于在培养基中一边使细胞悬浮一边进行培养的悬浮培养容易扩大规模，因此期待适合细胞的大量生产。

例如，非专利文献1中公开了使用旋转瓶作为悬浮培养的细胞培养容器，通过强搅拌力搅拌液体培养基，同时进行人多能干细胞的悬浮培养，制造均匀大小的球状体的方法。

非专利文献2中公开了使用形成了微小微孔的基板在各微孔中制备均匀大小的球状体的方法。

非专利文献3中公开了使用粘性、比重经过调整的培养基作为培养基，在保持多能干细胞的悬浮状态的同时抑制细胞彼此的碰撞并进行培养的方法。

专利文献1中公开了在液体培养基中对细胞进行回转培养来制备细胞的聚集体的技术。

专利文献2中公开了将多能干细胞悬浮培养至细胞团块的平均直径为约200μm以上且300μm以下的方法。

专利文献3中公开了通过在包含溶血磷脂酸(LPA)、鞘氨醇-1-磷酸(S1P)等溶血磷脂的培养基中对细胞进行悬浮培养来抑制细胞的聚集的技术。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2003-304866号公报

专利文献2：国际公开WO2013/077423号小册子

专利文献3：国际公开WO2016/121737号小册子

非专利文献

非专利文献1：Olmer R.et al.,Tissue Engineering:Part C,Volume 18(10):772-784(2012)

非专利文献2：Ungrin MD et al.,PLoS ONE,2008,3(2),e1565

非专利文献3：Otsuji GT et al.,Stem Cell Reports,Volume 2:734-745(2014)

发明内容

发明要解决的课题