[发明专利]包括胺的聚合酶链反应组合物

权利要求书

1.一种用于在核酸模板的核酸合成期间提高核酸合成产物的产量的方法，其包括：

a.将包括所述核酸模板的样品与包括一种或多种式I的胺或其盐的组合物混合：

其中

R1为H；

R2选自烷基、烯基、炔基或(CH2)n-R5，其中n＝1到3，并且R5为芳基、氨基、硫羟(thiol)、硫醇(mercaptan)、磷酸酯、羟基或烷氧基；并且

R3和R4可以是相同或不同的，并且独立地选自H或烷基，条件是如果R2为(CH2)n-R5，则R3和/或R4中的至少一个为烷基；

b.提供一种或多种用于合成核酸分子的酶；以及

c.在适于合成的条件下孵育所述混合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中同时提供所述一种或多种式I的胺和所述一种或多种用于合成核酸分子的酶。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述合成用于扩增所述核酸模板。

4.根据权利要求1到3中任一项所述的方法，其中所述一种或多种式I的胺和/或所述一种或多种用于合成核酸分子的酶处于可长期保存的稳定调配物中。

5.根据权利要求1到4中任一项所述的方法，其中所述一种或多种式I的胺和/或所述一种或多种用于合成核酸分子的酶通过包括稳定剂和/或去污剂的调配物来提供。

6.根据权利要求1到5中任一项所述的方法，其中所述样品包括一种或多种核酸合成抑制剂，所述一种或多种核酸合成抑制剂选自聚阴离子、离液剂、蛋白质、有机化合物、螯合剂、有机溶剂、金属离子或核酸嵌入染料。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述聚阴离子是肝素或木聚糖，和/或所述离液剂是十二烷基硫酸钠或尿素，和/或所述蛋白质是胶原蛋白、血红素或含血红素的蛋白质，和/或所述有机化合物是腐殖酸或胆汁盐，和/或所述螯合剂是柠檬酸盐或EDTA，和/或所述溶剂是乙醇或异丙醇，和/或所述金属离子是钙。

8.根据权利要求1到5中任一项所述的方法，其中在存在磁珠的情况下进行所述方法。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述磁珠是羧化磁珠。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述羧化磁珠是XP(贝克曼库尔特公司(Beckman Coulter,Inc))、Sera-Mag^TMSpeedBeads^TM(GE医疗生命科学公司(GE Healthcare Life Sciences))、MyOne羧化珠(DynaBeads)或RXNPure(欧米茄生物科技公司(Omega Bio-tek,Inc))珠。

11.根据权利要求1到10中任一项所述的方法，其中所述方法包括用于在步骤a之前纯化所述核酸的纯化步骤。

12.根据权利要求11述的方法，其中在存在磁珠的情况下进行所述纯化步骤。

13.根据权利要求1到12中任一项所述的方法，其中所述组合物进一步包括一种或多种另外的组分，所述一种或多种另外的组分选自：(i)一种或多种核酸分子；(ii)一种或多种核苷酸；(iii)一种或多种缓冲盐；和(iv)一种或多种辅助因子。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述一种或多种核酸分子包括RNA或DNA。

15.根据权利要求13或14所述的方法，其中所述一种或多种核酸分子包括至少一种引物。

16.根据权利要求13到15中任一项所述的方法，其中所述一种或多种核苷酸包括dNTP或NTP。