[发明专利]通过实时谷胱甘肽测量改善治疗细胞质量的方法

权利要求书

1.一种非诊断非治疗的改善细胞质量的方法，包括：

分离所需细胞；

测量分离细胞中的谷胱甘肽水平；

根据谷胱甘肽水平确定细胞质量；和

向分离的细胞中加入能够改善谷胱甘肽评估参数的物质；其中，根据谷胱甘肽水平对细胞质量的确定是根据选自下组的一种或多种评估参数来进行的：

i)细胞的谷胱甘肽的均值或中位水平；

ii)细胞的谷胱甘肽异质性；

iii)细胞的谷胱甘肽再生能力；和

iv)抗氧化应力能力，

其中，谷胱甘肽的均值或中位水平计算为细胞FreSH-示踪剂比率或F510的平均值或中位数，

谷胱甘肽异质性计算为细胞FreSH-示踪剂比率或F510的变异系数或稳健变异系数，

谷胱甘肽再生能力是通过用氧化剂处理细胞后实时检测FreSH-示踪剂比率或F510所获得的值，该值是通过第一氧化剂处理组的第一曲线下面积减去第二氧化剂处理组的第二曲线下面积所得的值，除以未处理对照组的第三曲线下面积减去第二氧化剂处理组的第二曲线下面积所得的值，并乘以100得到的，和

抗氧化应力能力是随谷胱甘肽表达而变化的细胞计数值，其通过将活细胞用第一氧化剂处理后定量的谷胱甘肽水平，与没有用氧化剂处理过的对照细胞或尚未用氧化剂处理的对照细胞中定量的谷胱甘肽水平进行比较而获得；

其中，所述F510为510nm处的荧光强度值，F580是580nm处的荧光强度值，FreSH-示踪剂比率为F510/F580，以及

其中，所述的能够改善谷胱甘肽评估参数的物质是选自下组的任意一种或多种：谷胱甘肽乙酯、抗坏血酸2-葡萄糖苷、谷胱甘肽、N-乙酰半胱氨酸、2-巯基乙醇、二硫苏糖醇、半胱氨酸、γ-谷氨酰胺基半胱氨酸、γ-谷氨酰胺基半胱氨酸酯、氧代4-噻唑烷羧酸、L-2-氧代-4-噻唑烷羧酸、硫辛酸、费洛他汀-1、立普他汀-1、维生素D3、1-α,25-二羟基维生素D3、维生素E、辅酶Q10、去铁胺、去铁酮、地拉罗司、黄芩苷、黄芩素、木犀草素、槲皮素、紫铆因和高半胱氨酸；

其中，FreSH-示踪剂选自式A-1、式A-2、式A-3、式A-4、式A-5、式A-6、式B-4和式B-8的化合物：

[式A-1]

[式A-2]

[式A-3]

[式A-4]

[式A-5]

[式A-6]

[式B-4]

[式B-8]

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，细胞质量改善的实现是通过提高作为谷胱甘肽评估参数的谷胱甘肽的均值或中位水平和谷胱甘肽再生能力，降低谷胱甘肽异质性，或在抗氧化应力能力测量中，降低用氧化剂处理的细胞的比率，从而表现出相对于未用氧化剂处理的细胞的谷胱甘肽减少。

3.如权利要求1所述的方法，还包括：

在添加能够改善谷胱甘肽评估参数的物质之前，先测量谷胱甘肽水平。

4.如权利要求3所述的方法，还包括：

通过测量谷胱甘肽水平，来检查在添加能够改善谷胱甘肽评估参数的物质之后，谷胱甘肽水平是否已经提高。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述所需细胞为：

选自下组中的任何一种干细胞：成体干细胞、胚胎干细胞和诱导性多能干细胞；

选自下组中的任何一种免疫细胞：树突状细胞、天然杀伤细胞、T细胞、B细胞、先天性淋巴样细胞、巨噬细胞、粒细胞、淋巴因子激活的杀伤细胞和细胞因子诱导的杀伤细胞；

选自下组的任何一种体细胞：成纤维细胞、软骨细胞、滑膜细胞、角质形成细胞、脂肪细胞、成骨细胞、破骨细胞和外周血单核细胞；

选自下组中的任何一种用于生产蛋白质制剂的细胞系：CHO细胞、NS0细胞、Sp2/0细胞、BHK细胞、C127细胞、HEK293细胞、HT-1080细胞和PER.C6细胞；或

选自下组的任何一种微生物组：来源于人或动物的口腔、鼻腔、肺、皮肤、胃肠道和泌尿道的微生物。