[发明专利]由多潜能干细胞进行的立体器官的构建

说明书

本发明解决在将功能细胞与源自脐带的血管内皮细胞及源白骨髓的间充质细胞共培养而由此构建立体结构(器官原基)的以往方法中，存在的[1]依赖于供体而质量存在较大的偏差，[2]细胞来源的增殖潜能有限，[3]由于来源不同而难以保证免疫相容性等问题。由血管细胞、间充质细胞、及组织或器官细胞制作的器官芽，其中所述血管细胞、间充质细胞、及组织或器官细胞分别为由多潜能干细胞诱导的细胞。器官芽的制作方法，包括将血管细胞、间充质细胞、及组织或器官细胞在体外培养，其中所述血管细胞、间充质细胞、及组织或器官细胞分别为由多潜能干细胞诱导的细胞。

技术领域

本发明涉及由多潜能干细胞进行的立体器官的构建。

背景技术

已有报告本发明人至今开发了通过将在再生医疗等中使用的功能细胞(源自多潜能干细胞的器官细胞等)与源自脐带的血管内皮细胞，源自骨髓的间充质细胞混合，由此构建立体组织(器官原基)的方法，该器官原基在体外下的功能及对于疾病模型动物的治疗效果等方面优于利用平面培养诱导分化成的细胞(非专利文献1：Nature 2013，非专利文献2：Cell Stem Cell 2015，专利文献1、2)。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：Takebe T等.，Nature 499，pp481-484，2013

非专利文献2：Takebe T等.，Cell Stem Cell 16，pp556-565，2015专利文献

专利文献1：WO2013/047639

专利文献2：WO2015/012158

发明概述

发明要解决的问题

在使用2种源自脐带、骨髓细胞的以往方法中，[1]依赖于供体而质量会存在较大的偏差，[2]细胞来源的增殖潜能有限，[3]由于来源不同而难以保证免疫相容性等问题在实用上是绝对性的课题。另外，由于源自脐带、骨髓的细胞是成熟度高的细胞，因此对在器官原基的制作时所需要的未成熟细胞而言分化阶段大不相同，与生物体内的产生有较大距离。

用于解决问题的方法

本发明人通过将用于制作立体的器官原基而使用的3种细胞种类全部由人工多潜能干细胞(iPS细胞)制作，由此成功实现由分化阶段的同步的未成熟细胞制作器官原基。具体而言，对于根据源自iPS细胞的肝内胚层细胞和源自iPS细胞的血管内皮细胞和源自iPS细胞的间充质细胞的组合制作人肝芽，将作为以往方法的利用源自iPS细胞的肝内胚层细胞和源自脐带的血管内皮细胞，源自骨髓的间充质细胞的组合制作的人肝芽，进行了体外的白蛋白分泌能、分化标记的基因表达等的比较。其结果与以往方法相比，确认了大幅的功能改善。另外，将相当于6x10⁶个的源自iPS细胞的肝内胚层细胞的肝芽移植到免疫缺陷动物(NOD/scid小鼠)中，结果发现，分泌到血清中的人白蛋白分泌量也得到了同样的结果。根据本发明，在追求大幅功能改善的同时，能够实现削减在品质评价及制造中涉及的成本及劳力。当取代iPS细胞而使用其它多潜能干细胞(例如：胚胎干细胞(ES细胞))的情况下，也可得到同样的效果的机率较高。

本发明的要旨如下。

(1)器官芽，其由血管细胞、间充质细胞、及组织或器官细胞制作，上述血管细胞、间充质细胞、及组织或器官细胞分别为由多潜能干细胞诱导的细胞。

(2)根据(1)所述的器官芽，其中，器官芽为能够通过成熟而分化为器官的结构体。

(3)根据(1)或(2)所述的器官芽，其中，多潜能干细胞源自人。

(4)根据(1)～(3)中任一项所述的器官芽，其中，多潜能干细胞为选自由人工多潜能干细胞及胚胎干细胞组成的组中的至少1种的细胞。