[发明专利]用于培养哺乳动物细胞的工艺

权利要求书

1.一种用于培养哺乳动物细胞的补料-分批方法,其包含使用pH设定点控制pH,该方法包含

第一培养阶段,包含将哺乳动物细胞接种入于第一pH的培养培养基并于第一pH培养细胞,其中在第一培养阶段中pH设定点维持于第一pH；和

第二培养阶段,包含于比第一pH要高的第二pH培养细胞,其中在第二培养阶段中设定点维持于第二pH；

且其中第二pH比第一pH要高至少0.1个pH单位,且其中第二培养阶段具有至少6小时的持续时间。

2.依照权利要求1的方法,其中第二培养阶段具有至少3天的持续时间。

3.依照权利要求1或权利要求2的方法,其中该方法的温度维持在±0.5℃内。

4.依照前述权利要求任一项的方法,其中第一pH是范围6.5-7.5中的值且:

a.第二pH比第一pH要高0.1至0.5个pH单位；或

b.第二pH比第一pH要高0.2个pH单位。

5.依照前述权利要求任一项的方法,其中

a.第一pH是约7.0；且

b.第二pH是约(i)pH 7.1；(ii)pH 7.2；(iii)pH 7.3；(iv)pH 7.4；(v)pH 7.5；或(vi)7.1-7.5。

6.依照前述权利要求任一项的方法,其中设定点或是(a)逐渐或是(b)即刻自第一pH升高至第二pH。

7.依照前述权利要求任一项的方法,其中设定点逐渐自第一pH升高至第二pH,且其中或是(a)设定点连续升高或是(b)设定点以一系列离散步骤升高。

8.依照前述权利要求任一项的方法,其中pH在约24-72小时的时段里逐渐自第一pH升高至第二pH。

9.依照前述权利要求任一项的方法,其包含将pH上移补料培养基添加至培养培养基。

10.依照前述权利要求任一项的方法,其中设定点具有±0.05个pH单位的死区。

11.依照前述权利要求任一项的方法,其中哺乳动物细胞是CHO细胞。

12.依照前述权利要求任一项的方法,其是用于生成产物的方法,其中产物是由哺乳动物细胞表达的,其中任选地哺乳动物细胞是重组细胞,且其中产物是重组蛋白。

13.依照权利要求12的方法,其中产物是(a)抗体；(b)凡努昔珠单抗(vanucizumab)；或(c)依米妥珠单抗(emactuzumab)。

14.依照权利要求12至13任一项的方法,其包含分离产物的步骤,和任选地制备包含产物的组合物的步骤。

15.通过权利要求14的方法生成的产物或组合物。

16.pH上移补料培养基或pH升高剂用于在如前述权利要求任一项中列出的用于培养哺乳动物细胞的方法中

a.提高哺乳动物细胞培养物中的产物滴度,其中产物是在哺乳动物细胞中表达的；

b.提高哺乳动物细胞培养物中的细胞存活力；

c.延长哺乳动物细胞培养物的寿命；

d.降低哺乳动物细胞培养物中的乳酸盐积累；

e.降低哺乳动物细胞培养物中的铵积累；

f.改善哺乳动物细胞培养物中的pCO₂概况；

g.降低哺乳动物细胞培养物中的渗透摩尔浓度的用途,其中将pH上移补料培养基或pH升高剂添加至哺乳动物细胞培养物以将pH自第一pH提高至第二pH。