[发明专利]多肽

说明书

本发明提供了一种嵌合多肽，其包含：抗原结合结构域，其与细胞因子受体的第一链的胞外域组成性结合；跨膜结构域；和来自细胞因子受体的第二链的胞内域，该嵌合多肽在细胞中表达时与细胞因子受体的内源性第一链结合，从而引起组成性细胞因子信号传导。

发明领域

本发明涉及一种嵌合多肽，当在细胞中表达时，其引起组成性细胞因子信号传导。本发明还涉及在细胞表面表达此类嵌合多肽和任选地嵌合抗原受体或工程化T细胞受体的细胞。

发明背景

嵌合抗原受体(CAR)

已经描述了一些用于癌症治疗中的免疫治疗剂，包括治疗性单克隆抗体(mAb)、双特异性T细胞衔接物和嵌合抗原受体(CAR)。

嵌合抗原受体是将单克隆抗体(mAb)的特异性移植到T细胞的效应子功能的蛋白质。它们通常的形式是I型跨膜结构域蛋白，其中抗原识别氨基末端、间隔区、跨膜结构域都连接至复合胞内域，该复合胞内域传输T细胞存活和活化信号。

这些分子的最常见形式是衍生自识别靶抗原的单克隆抗体的单链可变片段(scFv)经由间隔区和跨膜结构域与信号传导胞内域融合的融合物。此类分子响应于scFv对其靶标的识别导致T细胞活化。当T细胞表达此类CAR时，它们识别并杀伤表达靶抗原的靶细胞。已经开发出几种针对肿瘤相关抗原的CAR，并且使用此类表达CAR的T细胞的过继转移方法目前正处于临床试验中，用于治疗各种癌症。

CAR T细胞植入和增殖

CAR T细胞的功能取决于患者内细胞的存活和植入。在一些情况下，例如ALL，CAR-T的细胞存活长达9个月对于预防复发和实现持续缓解很重要。

通过施用细胞因子可以增强CAR T细胞的持久性和存活。CAR-T细胞也已经工程化以原位分泌细胞因子。但是，这两种方法都与优点相关。例如，细胞因子的系统性施用可以是有毒的，并且细胞因子的组成性产生可以导致不受控制的增殖和转化(Nagarkatti etal(1994)PNAS 91:7638-7642；Hassuneh et al(1997)Blood 89:610-620)。

另一种方法是工程化改造细胞以具有组成性细胞因子受体。例如，WO2017/029512描述了通过将细胞因子受体胞内域与“Fab”型外结构域(exodomain)连接而制备的组成性活化细胞因子信号传导嵌合跨膜蛋白(参见图2)。该结构使用抗体的天然二聚化组分，即来自重链和轻链恒定区的二聚化结构域。嵌合跨膜蛋白具有两条链；例如，第一多肽，其包含抗体轻κ链和IL2受体共同γ链作为胞内域；和第二多肽，其包含抗体重链CH1和胞内域，所述胞内域包含：IL2受体β链(提供组成性活化的IL2信号传导分子)；或IL7受体(提供组成性活化的IL7信号传导分子)。

当两种多肽均在细胞中表达时，两条链在细胞表面缔合并形成嵌合跨膜蛋白，从而提供组成性细胞因子(例如组成性IL-2或IL-7)信号传导。

附图说明

图1：概述各种细胞因子受体的结构，产生细胞因子的细胞类型和表达细胞因子受体的细胞类型的示意图。

图2：阐明WO2017/029512中描述的组成性活化细胞因子信号传导嵌合跨膜蛋白的示意图。嵌合跨膜蛋白包含二聚化结构域和细胞因子受体胞内域。该复合物具有“Fab”型构造，因为二聚化结构域包含抗体型重链和轻链恒定区。这些结构域之间的恒定区二聚化将IL2受体共同γ链与IL-2受体β链或IL-7受体α链聚集在一起，从而导致组成性细胞因子信号传导。