[发明专利]转谷氨酰胺酶变体

说明书

本发明提供了工程化转谷氨酰胺酶、编码这些酶的多核苷酸、包含这些酶的组合物、产生这些酶的方法以及使用这些工程化转谷氨酰胺酶的方法。

本申请要求于2017年11月7日提交的美国临时专利申请系列第62/582,593号的优先权，出于所有目的该美国临时专利申请被通过引用以其整体并入。

发明领域

本发明提供了工程化转谷氨酰胺酶(engineered transglutaminase enzymes)、编码这些酶的多核苷酸、包含这些酶的组合物、产生这些酶的方法以及使用这些工程化转谷氨酰胺酶的方法。

对序列表、表格或计算机程序的引用

序列表的正式副本作为ASCII格式的文本文件经由EFS-Web与本说明书同时提交，文件名为“CX2-164USP1_ST25.txt”，创建日期为2017年11月7日，并且大小为1,896千字节。经由EFS-Web提交的序列表是本说明书的一部分并且通过引用以其整体并入本文。

发明背景

转谷氨酰胺酶(TGase；EP 2.3.2.13)(R-谷氨酰胺酰基-肽-氨基酶-γ-谷氨酰转移酶)包括这样的酶家族，该酶家族催化蛋白质的翻译后修饰，在多胺或赖氨酸中的伯胺基团(即，胺供体)和一些蛋白质和多肽的谷氨酰基残基的γ-羧基酰胺基团(即，胺受体)之间产生共价酰胺键。这种酶促作用的结果包括对蛋白质构象的修饰和/或由相同和不同蛋白质的键合(bonding)产生高分子量缀合物而导致的广泛构象变化。这些酶可用于多种应用，包括在食品行业、化妆品行业、纺织品行业和制药行业中的应用。

发明概述

本发明提供了工程化转谷氨酰胺酶、编码该酶的多核苷酸、包含该酶的组合物以及使用该工程化转谷氨酰胺酶的方法。

本发明提供了与SEQ ID NO:2、6、34和/或256具有至少85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多的序列同一性的工程化转谷氨酰胺酶。在一些实施方案中，工程化转谷氨酰胺酶与SEQ ID NO:6具有至少85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多的序列同一性，并且具有在选自位置79、101、101/201/212/287、101/201/285、101/287和327的一个或更多个位置处的至少一种取代或取代集，其中所述位置参考SEQ ID NO:6来编号。在一些实施方案中，工程化转谷氨酰胺酶与SEQID NO:2具有至少85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多的序列同一性，并且具有在选自以下位置的一个或更多个位置处的至少一种取代或取代集：48,48/67/70,

48/67/70/181/203/256，48/67/70/181/256/345，48/67/70/181/296/345/373，48/67/70/203/256/296/345，

48/67/70/203/256/345/354/373，48/67/70/203/345，48/67/70/256，48/67/70/256/296/345/373，

48/67/203/256/296/373，48/67/203/256/345，48/70/170/203，48/70/203/254/296/343，

48/70/203/256/345/373，48/70/203/256/345，48/70/203/373，48/170/203，48/170/203/254/296/346，

48/170/203/254/296/346/373，48/170/203/254/346/373，48/170/203/254/346，