[发明专利]用于质谱法的基于亚砜的试剂

说明书

本发明涉及适用于分析物分子诸如肽的质谱测定的基于亚砜的试剂，以及这样的试剂和分析物分子的加合物，以及所述试剂和加合物的应用。此外，本发明涉及用于分析物分子的质谱测定的方法。

本发明涉及适用于分析物分子诸如肽的质谱测定的基于亚砜的试剂，以及这样的试剂和分析物分子的加合物，以及所述试剂和加合物的应用。此外，本发明涉及用于分析物分子的质谱测定的方法。

在开发允许在仅几个小时中进行人类基因组学研究的新基因组测序方法之后，^[1]我们现在正在见证新颖质谱方法的出现，所述方法现在使人们能够研究细胞和组织的完整蛋白质组。^[2-4]。

蛋白质组被定义为存在于样品中的所有蛋白质的集合，因此蛋白质组随细胞类型不同以及在不同组织中有很大差异。^[5]。

因此，蛋白质组学数据会提供关于细胞情况和潜在存在的疾病状态的指纹型信息。^[6]要深入了解生物系统的蛋白质组，必须获取关于不同样品中的各种蛋白质的水平的定量信息。如今，这用质谱法进行。由于完整蛋白质的精确定量是困难的，所以所述方法需要对蛋白质组进行消化（胰蛋白酶消化）以得到相应的肽。为了定量这些肽，进行了诸如代谢标记、^[7-8]无标记定量^[9]或同量异位标记^[10-11]之类的方法。

由于同量异位标记能够揭示肽丰度的甚至小的差异，并且因为可以在一次测量中对比许多样品，所以它是最常用的定量方法之一。^[12]。

但是，仍然需要提高MS分析方法的灵敏度，特别是对于通过MS定量分析具有低丰度的肽或在只有少量材料（诸如活组织检查组织）时。

目前可用的MS试剂的一个主要缺点是它们的低裂解效率，这会减少可用于定量分析的报告离子的数目并因此减少互补离子的数目。^[13]另外，报告物和平衡物单元之间的裂解会降低互补离子肽的电荷状态，且这可能导致MS不可见的中性物质的形成。

因此，本发明涉及一种用于MS中的新颖的基于亚砜的试剂，其允许极其灵敏地测定生物样品中的分析物分子诸如肽。此外，所述试剂的同位素修饰形式的应用允许获取用于对比研究的准确定量MS数据。特别地，本发明的试剂可以用于蛋白质组学中，从而能够精确定量复杂混合物中的肽。

因而，本发明的第一方面是适合用作质谱分析试剂的化合物，其具有通式(I)：

Z¹-L¹-(CR¹R²)-S(O)-CR³H-CH₂-C(-L²-Z²)R⁴(-L^x-X)

其中

Z¹是能够携带至少一个带电荷基团的电荷单元

L¹是键或间隔基，

Z²是能够携带至少一个带电荷基团的电荷单元，

L²是键或间隔基，

R¹、R²、R³、R⁴独立地是氢或C₁-C₃烷基，

X是能够与分析物分子反应，由此形成与所述分析物分子的共价键的反应基团，

L^X是键或间隔基。