[发明专利]诱导骨软骨修复的多能性干细胞

说明书

有可分化为多种系统的应激抗性的(Muse)细胞是存在于间充质干细胞(MSC)集团的阶段特异性的胚抗原3(SSEA‑3)阳性细胞。Muse细胞有分化为作为胚胎干细胞的全部胚层的多能性。在本研究中，旨在调查用于修复骨软骨损伤的Muse细胞移植的有效性。Muse细胞从人骨髓MSC单离。骨软骨损伤在免疫缺陷大鼠的膝盖沟发生。向该大鼠注射细胞，分为3组：在对照组中，注射PBS；在非Muse细胞组中，注射5×10⁴个SSEA‑3阴性的非Muse细胞；在Muse细胞组中，注射5×10⁴个SSEA‑3阳性的Muse细胞。被修复的组织在Muse组中在处置后的12周有大致平滑的均质表面，在对照及非Muse组中检测不到修复组织。根据组织学评价，在处置后的4周及12周与其他组比较而在Muse组中在骨软骨损伤部位显示更良好的修复。Muse细胞可为用于骨软骨损伤的治疗的新的有希望的细胞源。

【技术领域】

本发明涉及在再生医疗中使用的细胞制剂及/或医药组合物。更具体而言，本发明涉及含对于骨软骨损伤的治疗或修复有效的多能性干细胞的细胞制剂或医药组合物。

【背景技术】

软骨病变成为自身修复能力受限或起因于关节功能的降低的关节障碍的原因，这特别对应于高龄患者的重大的障碍(非专利文献1)[1]。

使用了骨髓刺激技术或骨软骨移植等的方法的若干临床试验作为改善软骨修复的尝试进行，但成功有限。在1994年，Brittberg等实施称为自身软骨移植(ACI)的第1代的细胞治疗(非专利文献2)[2]。Ochi等通过将端胶原凝胶与软骨细胞组合使用，改变ACI，带来良好的临床转归(非专利文献3)[3]。但是，由于Imtakt的软骨的罹患率、脱分化、及2阶段的外科的处置，成功依然受限。

近年，在再生医疗领域中，使用干细胞的细胞疗法对于各种各样的疾病进行研究，作为期待向临床应用的可能性的干细胞，已知胚胎干细胞(ES细胞)、神经干/前体细胞(NSPC)、人工多能性干细胞(iPS细胞)、脐带血干细胞(UCBC)。

另外，骨髓间充质细胞级分(MSC)从成体单离，已知有例如分化为骨、软骨、脂肪细胞、神经细胞、骨骼肌等的能力(非专利文献4及5)。但是，MSC是含各种各样的细胞的细胞群，不知其分化能的实体，在治疗效果上偏差大。另外，作为成体来源的多能性干细胞报告了iPS细胞(专利文献1)，在iPS细胞的建立中，除了以向体细胞导入对于作为间充质细胞的皮肤成纤维细胞级分特定的基因或特定的化合物这样的极其复杂的操作作为必要之外，iPS细胞有高的肿瘤形成能力，从而存在向临床应用的极其高的障碍。

在过去10年间，变得可容易地单离间充质干细胞(MSC)，从各种各样的组织非常容易地接入，而且非常地快速增殖，从而作为用于临床应用的基于细胞的治疗法广泛使用。再者，可广范围地分化为三胚层系(非专利文献6)[4]。

根据作为本发明人的一人的出泽的研究，存在于间充质细胞级分，无诱导操作地得到的以SSEA-3(Stage-Specific Embryonic Antigen-3)作为表面抗原表达的多能性干细胞(Multilineage-differentiating Stress Enduring cells；Muse细胞)担负间充质细胞级分所具有的多能性，得知有可应用于旨在组织再生的疾病治疗的可能性。另外还得知，Muse细胞可通过将间充质细胞级分用各种应激刺激来浓缩(专利文献2；非专利文献7)。

但是，伴随胎儿发育不全的脑障碍的改善及/或治疗中使用Muse细胞，无明显得到了期待的治疗效果的例。

【现有技术文献】

【专利文献】

【专利文献1】日本专利第4183742号公报

【专利文献2】国际公开第2011/007900号

【非专利文献】