[发明专利]RNA聚合酶变体在审
| 申请号： | 201880066673.3 | 申请日： | 2018-08-17 |
| 公开（公告）号： | CN111212905A | 公开（公告）日： | 2020-05-29 |
| 发明（设计）人： | 埃米·E·拉比多;阿萨纳西奥斯·杜西斯;干乍那·拉维钱德兰;埃莉萨·霍伯特 | 申请（专利权）人： | 摩登纳特斯有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 郑斌;刘振佳 |
| 地址： | 美国马*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | rna 聚合 变体 | ||
1.一种核糖核酸(RNA)聚合酶变体，其相对于野生型RNA聚合酶包含氨基酸取代，所述氨基酸取代导致所述RNA聚合酶变体的环结构随着所述RNA聚合酶变体从起始复合物转变成延伸复合物经历向螺旋结构的构象变化。
2.如权利要求1所述的RNA聚合酶变体，其中所述氨基酸取代相对于野生型氨基酸具有较高的螺旋倾向性。
3.如权利要求1或2所述的RNA聚合酶变体，其中所述RNA聚合酶是T7 RNA聚合酶。
4.如权利要求1-3中任一项所述的RNA聚合酶变体，其中所述环结构呈C螺旋结构。
5.如权利要求1-4中任一项所述的RNA聚合酶变体，其中所述环结构呈C接头结构。
6.如权利要求1-4中任一项所述的RNA聚合酶变体，其中所述氨基酸取代是高螺旋倾向性氨基酸取代。
7.如权利要求6所述的RNA聚合酶变体，其中所述高螺旋倾向性酸取代选自丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺和谷氨酸。
8.如权利要求7所述的RNA聚合酶变体，其中所述高螺旋倾向性氨基酸取代是丙氨酸。
9.如权利要求1-8中任一项所述的RNA聚合酶变体，其中所述T7 RNA聚合酶变体包含与SEQ ID NO：1具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％，或至少99％同一性的氨基酸序列。
10.如权利要求9所述的RNA聚合酶变体，其中所述T7 RNA聚合酶包含与SEQ ID NO：1具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性的氨基酸序列，所述氨基酸序列经修饰以包含在选自E42、S43、Y44、E45、M46、G47、A255、R257、A258、G259、A260、L261以及A262的位置处的高螺旋倾向性氨基酸的氨基酸取代。
11.如权利要求10所述的RNA聚合酶变体，其中所述氨基酸取代包括S43A。
12.如权利要求10所述的RNA聚合酶变体，其中所述氨基酸取代包括G47A。
13.如权利要求1-12中任一项所述的RNA聚合酶变体，其进一步包含额外的C末端氨基酸。
14.如权利要求13所述的RNA聚合酶变体，其中所述额外的C末端氨基酸包括甘氨酸(G)。
15.如权利要求11、13或14中任一项所述的RNA聚合酶变体，其中所述RNA聚合酶变体包含SEQ ID NO：108的氨基酸序列。
16.如权利要求12-14中任一项所述的RNA聚合酶变体，其中所述RNA聚合酶变体包含SEQ ID NO：110的氨基酸序列。
17.一种核糖核酸(RNA)聚合酶变体，其相对于野生型RNA聚合酶包含额外的C末端氨基酸。
18.如权利要求17所述的RNA聚合酶变体，其中所述RNA聚合酶变体是T7 RNA聚合酶变体。
19.如权利要求18所述的RNA聚合酶变体，其中所述RNA聚合酶变体与野生型T7 RNA聚合酶具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性。
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