[发明专利]NR4A1配体、药物组合物以及相关使用方法

说明书

描述了NR4A1配体、包含所述NR4A1配体的药物组合物以及相关的使用方法。治疗可通过调节NR4A1活性治疗的个体的疾病或病症的方法，其包括向所述个体给予治疗有效量的本文所述的化合物或药物组合物。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2017年8月10日提交的第62/543761号美国申请的权益，其内容通过引用并入本文。

背景

核受体亚家族4的A组成员1(NR4A1)在结肠、胰腺、乳腺(雌激素受体阳性和阴性)和肺部肿瘤中过表达；在乳腺、结肠和肺部肿瘤患者中，NR4A1的高表达预示着生存率降低。NR4A1在癌症中的功能活性已通过敲低或过表达在癌细胞系中进行了广泛研究，且结果已表明在肺癌、黑色素瘤、淋巴瘤、胰腺癌、结肠癌、乳腺癌、肾癌、宫颈癌、卵巢癌和胃癌细胞系中，NR4A1调节癌细胞增殖、存活、细胞周期进程、迁移和侵袭中的一种或多种(图1)。研究已将β1和其他整联蛋白确定为NR4A1调节的基因。研究还表明NR4A1在横纹肌肉瘤(RMS)患者的肿瘤中过表达，并且该受体调节RMS细胞中的促癌途径，如图1所示。NR4A1的促癌功能包括调节几个本身是单一药物靶点的基因，包括整联蛋白、存活蛋白、EGFR和其他受体酪氨酸激酶。

这表明NR4A1拮抗剂的开发将代表独特的化学疗法，其同时靶向与实体瘤的生长、存活和迁移/侵袭相关的多种促癌途径。研究最初表明几种1,1-双(3'-吲哚基)-1-(对位取代的苯基)甲烷(C-DIM)化合物使NR4Al失活，随后的研究确定了作为NR4A1配体的DIM-C-pPhOH和其他对位取代的苯基类似物。DIM-C-pPhOH和相关化合物在细胞培养物中在10-20μM的浓度下阻断图1中概述的促癌途径，并在30-40mg/kg/d的剂量下部分抑制肿瘤生长。DIM-C-pPhOH对NR4A1具有高结合亲和力(Ko-0.100μM)，但显示出短的体内半衰期。

如上所述，研究已经集中在结合NR4A1并充当拮抗剂(反向激动剂)的NR4A1配体的开发上。本发明的一名或多名发明人的研究已经依赖于RNA干扰(RNAi)以敲低NR4A1，以及依赖于分子/生化研究来确定受体敲低对细胞功能和细胞功能所需的相关途径的影响。初步研究表明NR4A1的敲低导致胰腺癌细胞生长减缓和凋亡的诱导；在横纹肌肉瘤、肺癌、乳腺癌、肾癌和结肠癌细胞系中也观察到了这一点。机理研究表明NR4A1通过与结合到促存活(存活蛋白和bcl2)和生长促进(EGFR和其他受体酪氨酸激酶)基因的近端富含GC的区域的Sp转录因子相互作用，充当激活这些基因的辅因子。与其他辅因子(例如p300)偶联的NR4A1激活并调节这些基因的表达。

已经证明在一系列C-DIM类似物中，对羟基苯基类似物(DIM-C-pPhOH；CDIM8)不仅结合于NR4A1，而且充当拮抗剂。因此，DIM-C-pPhOH抑制癌细胞的生长和存活，并抑制存活蛋白、EGFR和其他NR4A1/Sp调节的基因的表达。通过RNAi对NR4A1的敲低也通过sestrin的p53依赖性和非依赖性活化来抑制mTOR信号传导；在多种癌细胞系中针对DIM-C-pPhOH和其他NR4A1/C-DIM拮抗剂观察到相似的结果。NR4A1通过调节异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)和含硫氧还蛋白结构域蛋白5(TXNDC5)的表达，在维持癌细胞系中的低氧化应激方面也起关键作用。敲低NR4A1或用DIM-C-pPhOH和其他NR4A1拮抗剂处理降低IDH1和TXNDC6的表达，导致在许多癌细胞系中的活性氧(ROS)的诱导、ROS依赖性内质网应激以及细胞死亡(图1)。最近的研究表明NR4A1在癌细胞迁移/侵袭中起关键作用，这是由于NR4A1/Sp介导的β1-整联蛋白(一种促侵袭基因)的调节。敲低NR4A1或用DIM-C-pPhOH或其他NR4A1拮抗剂处理减少癌细胞迁移并下调β1-整联蛋白和其他整联蛋白(图1)。