[发明专利]经过基因组编辑的鸟有效

专利信息
申请号: 201880064933.3 申请日: 2018-09-17
公开(公告)号: CN111315212B 公开(公告)日: 2022-06-14
发明(设计)人: Y·西纳蒙;E·本塔尔科恩 申请(专利权)人: 以色列农业和农村发展部农业研究组织(范卡尼中心)
主分类号: C12N15/63 分类号: C12N15/63;C12N15/85;C12N5/0735;C12N15/90;A01K67/027
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 王永伟
地址: 以色列*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 经过 基因组 编辑
【权利要求书】:

1.一种DNA编辑剂,其包含

(a)第一核酸序列,用于在包含于鸟蛋中的雄性鸟胚胎中引发诱导型致死性表型;和

(b)第二核酸序列,用于使所述第一核酸序列靶向所述鸟的细胞的Z染色体,其中所述细胞包含所述鸟的原始生殖细胞或配子细胞;

其中所述DNA编辑剂用于在携带所靶向的Z染色体的所述雄性鸟胚胎中可诱导地实现所述致死性表型;

其中所述第一核酸序列编码致死性蛋白质,所述第一核酸序列可操作地连接到编码控制所述致死性蛋白质的表达的开关的核苷酸序列,所述开关由诱导剂调节;并且

其中所述致死性蛋白质选自由以下组成的组:毒素、促细胞凋亡蛋白质、干扰早期胚胎发生的基本阶段的蛋白质、Wnt信号传导路径的抑制剂、BMP拮抗剂、诺金、FGF拮抗剂和N-钙粘附蛋白。

2.根据权利要求1所述的DNA编辑剂,其为单个分子。

3.根据权利要求1所述的DNA编辑剂,其中所述第一核酸序列和所述第二核酸序列包含在不同分子中。

4.根据权利要求1所述的DNA编辑剂,其中所述第一核酸序列编码可以进行基因组编辑的核酸内切酶,所述第一核酸序列可操作地连接到编码控制所述核酸内切酶蛋白质的表达的开关的核苷酸序列,所述开关由诱导剂调节。

5.根据权利要求2所述的DNA编辑剂,其中所述第二核酸序列包含:

(i)左同源臂(LHA)核苷酸序列,其与

位于所述鸟的Z染色体中的靶基因基因座侧面的5'区域基本上同源;和

(ii)右同源臂(RHA)核苷酸序列,其

与位于所述鸟的Z染色体中的所述靶基因基因座侧面的3'区域基本上同源。

6.根据权利要求1或4所述的DNA编辑剂,其中所述诱导剂选自由以下组成的组:热、超声波、电磁能和化学物质。

7.根据权利要求1或4所述的DNA编辑剂,其中所述开关包含分离的重组酶,所述分离的重组酶在所述诱导剂存在下组合以形成活性酶。

8.根据权利要求1或4所述的DNA编辑剂,其中所述开关包含诱导型启动子。

9.根据权利要求4所述的DNA编辑剂,其中所述核酸内切酶是RNA导向的DNA核酸内切酶。

10.根据权利要求9所述的DNA编辑剂,其进一步包含编码靶向所述鸟的必需基因的向导RNA的核苷酸序列,所述核苷酸序列可操作地连接到编码所述开关的核苷酸序列。

11.根据权利要求10所述的DNA编辑剂,其中所述必需基因选自由以下组成的组:BMPR1A、BMP2、BMP4和FGFR1。

12.根据权利要求9所述的DNA编辑剂,其中所述RNA导向的DNA核酸内切酶选自由以下组成的组:锌指核酸酶(ZFN)、转录活化因子样效应子核酸酶(TALEN)和半胱天冬酶9。

13.根据权利要求1所述的DNA编辑剂,其进一步包含编码报告基因多肽的核苷酸序列。

14.根据权利要求1或4所述的DNA编辑剂,其中所述诱导剂是电磁能。

15.根据权利要求14所述的DNA编辑剂,其中所述电磁能为可见光的组分。

16.根据权利要求15所述的DNA编辑剂,其中所述可见光的组分为蓝光。

17.根据权利要求1所述的DNA编辑剂,其中所述鸟选自由以下组成的组:鸡、火鸡、鸭和鹌鹑。

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