[发明专利]具有修饰的磷脂酶结构域的腺相关病毒(AAV)

权利要求书

1.一种核酸分子，其包含编码腺相关病毒(AAV)病毒衣壳蛋白的多核苷酸序列，其中所述病毒衣壳蛋白包含修饰的亚基1(VP1)序列，所述修饰的亚基1序列包含位置1处的丝氨酸、位置26处的谷氨酸、位置40处的精氨酸、位置43处的天冬氨酸、位置44处的丝氨酸和位置64处的赖氨酸，其中所述氨基酸位置是相对于SEQ ID NO:1中给出的序列定义的，其中在位置1、26、40、43、44和64中的任何一处或多处的所述氨基酸相对于相应的野生型序列被修饰，且其中除了在所述任何一个或多个位置1、26、40、43、44和64处的那些以外，没有另外的氨基酸相对于所述相应的野生型序列被修饰。

2.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述病毒衣壳蛋白选自由以下组成的组：

(i)来自AAV1的病毒衣壳蛋白，其中所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:15中给出的序列；

(ii)来自AAV3的病毒衣壳蛋白，其中所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:16中给出的序列；

(iii)来自AAV4的病毒衣壳蛋白，其中所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:17中给出的序列；

(iv)来自AAV5的病毒衣壳蛋白，其中所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:18中给出的序列；

(v)来自AAV6的病毒衣壳蛋白，其中所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:19中给出的序列；

(vi)来自AAV7的病毒衣壳蛋白，其中所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:20中给出的序列；

(vii)来自AAV8的病毒衣壳蛋白，其中所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:21中给出的序列；

(viii)来自AAV9的病毒衣壳蛋白，其中所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:22中给出的序列；

(ix)来自AAV10的病毒衣壳蛋白，其中所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:23中给出的序列；

(x)来自AAV11的病毒衣壳蛋白，其中所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:24中给出的序列；

(xi)来自AAV12的病毒衣壳蛋白，其中所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:25中给出的序列；和

(xii)来自AAV13的病毒衣壳蛋白，其中所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:26中给出的序列。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的核酸分子，其中所述病毒衣壳蛋白来自AAV8，且所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:21中给出的序列。

4.根据权利要求1或权利要求2所述的核酸分子，其中所述病毒衣壳蛋白来自AAV9，且所述修饰的VP1序列包含SEQ ID NO:22中给出的序列。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的核酸分子，其中所述病毒衣壳蛋白包含来自与所述修饰的VP1相同的AAV血清型的亚基2(VP2)和亚基3(VP3)序列。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的核酸分子，其中编码所述AAV病毒衣壳蛋白的所述核苷酸序列与用于在昆虫细胞中表达的启动子可操作地连接。

7.根据权利要求6所述的核酸分子，其中所述用于在昆虫细胞中表达的启动子是多面体启动子或p10启动子。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的核酸分子，其包含编码至少一种选自Rep78和Rep68的大AAV复制(Rep)蛋白和至少一种选自Rep52和Rep40的小AAV Rep蛋白的多核苷酸序列。

9.根据权利要求8所述的核酸分子，其包含编码Rep78和Rep52的多核苷酸序列。

10.根据权利要求8或权利要求9所述的核酸分子，其中编码所述Rep蛋白的所述多核苷酸序列与用于在昆虫细胞中表达所述Rep蛋白的启动子可操作地连接。