[发明专利]制造多层管状组织构建体的方法

权利要求书

1.制造可灌注的多层管状组织构建体的方法，其包括：

在基材上沉积一个或多个丝状物，各丝状物包括：多个同心和共轴的载细胞墨层、和包括逃逸性墨的芯，各载细胞墨层包括一种或多种预定的细胞类型并延伸所述丝状物的至少一部分长度，其中所述逃逸性墨充当用于所述丝状物内的可灌注的开放腔的模板；

将所述逃逸性墨除去以产生可灌注的开放腔；和

将所述一个或多个丝状物暴露到流体灌注以引发细胞增殖和发育，由此产生所述可灌注的多层管状组织构建体。

2.如权利要求1所述的方法，其中在基材上沉积一个或多个丝状物的步骤包括：

使所述逃逸性墨流动通过第一挤出管；

使包括一种或多种预定的细胞类型的第一载细胞墨流动通过覆盖所述第一挤出管的第二挤出管，所述第一载细胞墨围绕所述逃逸性墨流动并将其包封；

使包括一种或多种预定的细胞类型的第二载细胞墨流动通过覆盖所述第二挤出管的第三挤出管，所述第二载细胞墨围绕所述第一载细胞墨流动并将其包封，

由此形成所述包括逃逸性墨的芯，其由包括第一载细胞墨层的内层和包括第二载细胞墨层的外层所围绕。

3.如权利要求1至2任一项所述的方法，其进一步包括提供挤出头，该挤出头包括以同心构造布置的所述第一、第二和第三挤出管，其中所述挤出头在所述逃逸性墨、所述第一和第二载细胞墨的流动期间相对于所述基材移动，所述丝状物以预定的构造沉积在所述基材上。

4.如权利要求1至3任一项所述的方法，其中各载细胞墨包含不同类型的活细胞。

5.如权利要求1至4任一项所述的方法，其中各载细胞包括重叠的活细胞群。

6.如权利要求1至5任一项所述的方法，其中所述细胞选自平滑肌细胞(血管的、肠道的、或支气管的)、间充质细胞(成纤维细胞、间充质干细胞)、周细胞、内皮细胞(血管或淋巴内皮)、或上皮细胞(肠道上皮衬里、结肠上皮衬里、气道上皮衬里)。

7.如权利要求2至6任一项所述的方法，其中所述第一载细胞墨包含平滑肌细胞。

8.如权利要求2至7任一项所述的方法，其中所述第二载细胞墨包含成纤维细胞。

9.如权利要求1至8任一项所述的方法，其进一步包括在除去所述逃逸性墨之后将内皮细胞的悬浮液注入到所述可灌注的开放腔中。

10.如权利要求1至9任一项所述的方法，其中所述载细胞墨层形成血管的中层和外膜层。

11.如权利要求1至10任一项所述的方法，其中所述可灌注的多层管状构建体与血管在结构和功能上相似。

12.如权利要求1至11任一项所述的方法，其中所述多层管状构建体为支化的多层管状构建体。

13.如权利要求1至11任一项所述的方法，其中所述一种或多种预定的细胞类型为细胞聚集体或细胞簇。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述细胞聚集体或细胞簇的尺寸在约10个细胞/聚集体或簇到约1百万个细胞/聚集体或簇的范围内。

15.如权利要求1至14任一项所述的方法，其进一步包括用细胞外基质组合物至少部分地围绕所述一个或多个丝状物。

16.如权利要求15所述的方法，其中所述细胞外基质组合物包括如下的一种或多种：明胶、纤维蛋白、纤维蛋白原、谷氨酰胺转氨酶、凝血酶和明胶甲基丙烯酸酯、胶原蛋白、任何种类的胶原蛋白-丙烯酸酯(或可交联的形式)、基质胶、聚乳酸-共-乙醇酸(PLGA)、藻酸盐、或壳聚糖。