[发明专利]抗脱落酶的TREM2变体

说明书

本文提供了与抗脱落酶切割的TREM2突变体例如与抗脱落酶切割的人TREM2突变体相关的方法和组合物，以及编码此类抗脱落酶切割的TREM2突变体的核酸。

序列表

本申请含有已经以ASCII格式电子递交的序列表并且所述序列表特此通过引用以其全文并入。所述ASCII副本创建于2018年7月20日，名称为PAT057836-WO-PCT_SL.txt并且大小为60,538字节。

技术领域

本发明提供了与抗脱落酶切割的TREM2突变体例如与抗脱落酶切割的人TREM2突变体相关的方法和组合物，以及编码此类抗脱落酶切割的TREM2突变体的核酸。

背景技术

髓系细胞触发受体蛋白或“TREM”是在不同类型的髓系细胞(例如肥大细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突细胞和嗜中性粒细胞)上表达的一组跨膜糖蛋白。TREM在其细胞外结构域中具有免疫球蛋白(Ig)型折叠，因此属于免疫球蛋白超家族(IgSF)。TREM受体含有短的细胞内结构域，但是缺少用于信号传导介质的对接基序(docking motif)，并且需要用于细胞激活的衔接蛋白，例如DAP12(12kDa的DNAX激活蛋白)。已报道两个TREM成员：TREM1和TREM2，两者都在免疫和炎症应答中起重要作用。

TREM2在巨噬细胞、树突细胞、破骨细胞、小神经胶质细胞、肺上皮细胞和肝癌细胞上表达，但是在血液中的髓系细胞中不存在。TREM2与DAP12物理相关联，DAP12充当TREM2和许多其他细胞表面受体的信号传导衔接蛋白。DAP12的细胞质结构域含有免疫受体酪氨酸激活基序(ITAM)(Wunderlich，J.Biol.Chem[生物化学杂志].288，33027-33036，2013)。相互作用受体激活后，DAP12通过Src激酶在两个保守性ITAM酪氨酸残基上经历磷酸化。随后的Syk蛋白激酶的募集和激活触发下游信号传导途径，包括丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)和磷脂酶Cγ(PLCγ)的激活。

TREM2可以被以下激活：脂多糖(LPS)，热休克蛋白60，神经碎片，细菌和各种阴离子和两性离子脂质，例如磷脂酸(PA)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰胆碱(PC)和鞘磷脂。TREM2激活增加小神经胶质细胞和巨噬细胞的吞噬能力，减少促炎细胞因子的释放并限制TLR信号传导。TREM2通过与CSF-1受体信号传导协同来维持小神经胶质细胞存活。此外，TREM2与调节细胞粘附和运动的丛蛋白-A1相互作用。TREM2信号传导促进摄入的捕获物的降解，并且对于脂质代谢、髓鞘质摄取和细胞内分解是至关重要的。

TREM2通过胞外结构域脱落和膜内蛋白水解进行顺序蛋白水解加工(Wunderlich，J.Biol.Chem.[生物化学杂志]288，33027-33036，2013)。在胞外结构域脱落期间，TREM2的胞外结构域由蛋白酶释放，所述蛋白酶是例如ADAM(含有解整联蛋白和金属蛋白酶结构域的蛋白质)或BACE(b-位点APP切割酶)家族的成员(Kleinberger，Sci.Transl.Med.[科学转化医学]2014；6(243)：243ra86)。去除胞外结构域后，通过γ-分泌酶介导的膜内蛋白水解进一步处理剩余的膜保留片段。已经在树突细胞培养物的上清液以及来自患有非炎性神经疾病和多发性硬化的患者的血浆和CSF样品中观察到由胞外结构域脱落产生的TREM2的可溶性片段(sTREM2)(Kleinberger，2014)。人CSF中TREM2(sTREM2)的脱落的胞外结构域已经被评估为潜在的阿尔茨海默病(AD)生物标记物，并且已经显示在一般的衰老过程中增加(Suarez-Calvet，EMBO Molecular Medicine[欧洲分子生物学学会杂志之分子医学]8，466-476，2016)。在AD过程中的详细分析揭示，在AD痴呆中，sTREM2在临床症状出现之前在AD早期增加，在MCI-AD中达到峰值，并且保持升高的但是与MCI-AD阶段相比较低的水平(Suarez-Calvet，2016)。

发明内容