[发明专利]光控性病毒蛋白质、其基因及包含该基因的病毒载体在审
| 申请号: | 201880046636.6 | 申请日: | 2018-07-11 |
| 公开(公告)号: | CN111094569A | 公开(公告)日: | 2020-05-01 |
| 发明(设计)人: | 谷宪三朗;佐藤守俊;竹田诚;田原舞乃 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人东京大学 |
| 主分类号: | C12N15/40 | 分类号: | C12N15/40;C07K14/08;C07K19/00;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/62 |
| 代理公司: | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人: | 薛琦 |
| 地址: | 日本东京都*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 光控 性病 蛋白质 基因 包含 病毒 载体 | ||
1.一种病毒蛋白质基因,该病毒蛋白质基因在具有酶活性的病毒蛋白质的可导入外源基因的区域以可表达的方式插入有编码光开关蛋白质的基因,其中,所述光开关蛋白质包含至少2个亚基,编码各亚基的基因介以接头连接,或者不介以接头而直接连接。
2.如权利要求1所述的病毒蛋白质基因,其中,所述接头为10~100个氨基酸残基。
3.如权利要求1或2所述的病毒蛋白质基因,其中,所述编码光开关蛋白质的基因为Magnet基因。
4.如权利要求3所述的病毒蛋白质基因,其中,该基因可通过照射波长450~490nm的光来调节所述病毒蛋白质的活性。
5.如权利要求1~4中的任一项所述的病毒蛋白质基因,其中,具有酶活性的病毒蛋白质为具有聚合酶或蛋白质酶结构域的病毒蛋白质。
6.如权利要求1~5中的任一项所述的病毒蛋白质基因,其中,所述病毒为RNA病毒。
7.如权利要求1~6中的任一项所述的病毒蛋白质基因,其中,所述病毒蛋白质为RNA依赖性RNA聚合酶。
8.如权利要求7所述的病毒蛋白质基因,其中,所述RNA依赖性RNA聚合酶为RNA依赖性RNA聚合酶L蛋白质。
9.如权利要求7或8所述的病毒蛋白质基因,其中,所述可导入外源基因的区域为Ln结构域与Lc结构域之间的区域。
10.如权利要求1~9中的任一项所述的病毒蛋白质基因,其中,在所述编码光开关蛋白质的基因的上游和/或下游还包含接头。
11.一种核酸,其中,该核酸编码权利要求1~10中的任一项所述的病毒蛋白质基因。
12.一种载体,其中,包含编码权利要求1~10中的任一项所述的病毒蛋白质基因的核酸。
13.一种病毒或病毒载体,其中,包含权利要求1~10中的任一项所述的病毒蛋白质基因。
14.一种试剂盒,其中,包含权利要求11所述的核酸、权利要求11所述的载体、或权利要求12所述的病毒或病毒载体。
15.一种细胞,其中,包含权利要求11所述的核酸。
16.如权利要求15所述的细胞,其中,所述细胞为iPS细胞或其后代细胞。
17.一种通过病毒载体暂时性感染细胞的方法,其中,包括:
使包含导入基因的权利要求13所述的病毒或病毒载体感染细胞的工序;
在光照下培养已感染的细胞的工序;以及
在无光照条件下培养已感染的细胞的工序。
18.一种使导入基因表达的方法,其中,包括:
使包含导入基因的权利要求13所述的病毒或病毒载体感染细胞的工序;以及
在光照下培养已感染的细胞的工序。
19.一种iPS的制造方法,其中,包括:
使包含选自Oct3/4、Sox2、Klf4、l-Myc(或c-Myc)、Nanog和Lin28的至少1种导入基因的权利要求13所述的病毒或病毒载体感染体细胞的工序;以及
在光照下培养已感染的细胞的工序。
20.如权利要求18或19所述的方法,其中,还包括:在无光照条件下培养已感染的细胞的工序。
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