[发明专利]用于计数和/或表征细胞的测量试管

说明书

本发明涉及用于计数和/或表征细胞的测量试管(1)，所述测量试管(1)包括基部(11)和从基部(11)延伸以与基部一起形成光学测量室(13)的透明侧向外壳(12)；所述基部(11)具有直径为30至100μm的通孔(111)以便细胞通过，其特征在于，所述基部(11)和所述透明侧向外壳(12)形成既适合阻抗测量又适合光学测量的一件式试管(1)。本发明还涉及用于表征细胞的系统，包括所述测量试管(1)。

技术领域

本发明涉及流式细胞术的技术领域，特别是例如测量试管(cuvette)和这种测量试管的支撑件的流式细胞术配件。

背景技术

如今，流式细胞术使得确定细胞特征和属性，如细胞大小、细胞内容物、DNA含量等成为可能。它还使研究这些特征在细胞群内的变化和分布成为可能，最终导致细胞间亚群的识别，例如组成血液的各种细胞的分化。

而且，流式细胞术是一种快速方法。通常，每分钟有几千个细胞被表征。因此，它能够实现罕见细胞亚群的计数和表征。这些亚群的罕见性通常使它们不能通过显微镜观察和表征，特别是由于无法对这些亚群获得在统计学上可接受的大量测量数据。

此外，由于近年来光学传感器的改善，尤其是它们检测强度越来越低的信号的能力的改善，可以一方面通过阻抗测量，另一方面通过光学测量既测量细胞的体积又获取关于细胞内容物的信息。

流式细胞术本质上包括使得细胞单独地在相对于细胞大小的大横截面液流中通过。这种液流的末端是喷嘴，喷嘴具有孔，孔的大小被设置成防止两个或多个细胞同时通过或随时间推移过密通过。液流和孔之间的流量不变，细胞的速度随着液流的直径减小在喷嘴的出口增加，细胞在具有喷嘴直径的液体射流中达到每秒几千级别的速度。

细胞体积的测量通过测量喷嘴孔两侧的阻抗来实现。事实上，细胞的体积与细胞在导电介质(库特系统)中通过所引起的阻抗变化有关，细胞被认为是电绝缘的。体积被绝对地确定，不管细胞的形状如何。

此外，细胞通过喷嘴孔提供了细胞一定程度的流体动力对中，还有它们的取向。因此，有可能准确地定位从喷嘴流出并将细胞包含于激发源发射的光束中的射流。当细胞穿过光束时，它使一定数量的光信号扩散，这些光信号适于由细胞计使用以确定细胞的属性。这些光信号包括:

-光在细胞上的反射，由于液体和细胞之间的指数不同，而且细胞的不同组成部分之间的指数也不同，由入射光线的一部分的反射表示；

-光在细胞上的折射，由进入细胞的光线的偏移表示；和

-光在细胞上的衍射，基本上在范围从几度到360度的立体角下。

所有这些信号都由光学收集系统收集，然后根据它们的波长(20到50nm或30到40nm之间的中-高宽度)由光学过滤器的系统分离，最后到达各种光传感器。这些各种传感器可能适用于：

-测量细胞的前向散射；

-测量细胞的侧向散射；

-测量细胞的吸光度；和

-测量细胞的荧光。

前向散射是由于到达细胞膜的表面上的一部分入射光由细胞膜表面的散射。该部分散射光与入射光的波长相同。它沿着入射光的轴线感测。它提供关于细胞的大小和平均折射率的信息。

侧向散射是由于经过细胞膜的入射光部分由细胞内细胞器在所有空间方向上的散射。它可以被光电倍增管或雪崩光电二极管感测。它利用了折射和反射属性，提供关于细胞内容物的精细异质性的信息。

吸光度需要稳定的激发源。它与细胞的直径和细胞内细胞器的吸收指数成正比。