[发明专利]用于定量胰岛素和C-肽的方法

说明书

描述了用于诊断或预后糖尿病和糖尿病前期患者中胰岛素抵抗性的方法，该方法包括确定样品中胰岛素和C‑肽的量。本文提供的是用于检测和定量生物样品中胰岛素和C‑肽的质谱法，其利用与串联质谱或高分辨/高准确度质谱技术偶联的富集和/或纯化方法。

相关申请的交叉引用

本申请根据35 U.S.C.§119(e)要求2017年3月31日提交的美国临时申请序号62/480,029和2018年3月16日提交的美国临时申请序62/644,378的权益，其内容通过引用以其全部并入本公开。

背景技术

在表面健康的人群中，胰岛素抵抗性变化数倍，并且这些个体的最胰岛素抵抗的四分之一和三分之一之间的某些值处于发展一系列代谢异常和相关临床综合征的增加的风险下。在临床水平上，直接估计胰岛素介导的葡糖糖处置(glucose disposal)是不切实际的。但是，血浆胰岛素浓度与胰岛素介导的葡糖糖处置的直接测量高度相关，并且这已经导致引入基于血浆胰岛素和葡萄糖浓度的测量值的胰岛素抵抗性的几种替代评估。不幸的是，没有标准化的胰岛素测定法。结果，不可能建立普遍适用的数值分割点，用它来鉴定具有足够胰岛素抵抗的表面健康的个体处于许多不良临床结果的高风险下。

响应于该难题，已经提出了许多基于通常测量的与IR相关的代谢异常的替代标志物，以帮助在明显疾病发展之前鉴定胰岛素抵抗的个体。例如，代谢综合征(MetS)的诊断就是这种方法的例子。尽管MetS的诊断与直接测量胰岛素介导的葡糖糖处置相关，但表面健康人的最胰岛素抵抗群体的三分之一中仅约50％有资格诊断MetS。

需要可靠和准确的方法用于鉴定胰岛素抵抗性。

发明内容

在一个方面中，本文提供了用于诊断或预后糖尿病和糖尿病前期患者的胰岛素抵抗性的方法，该方法包括通过确定样品中胰岛素和C-肽的量测量患者的胰岛素和c-肽水平。

在某些实施方式中，本文提供的方法包括通过质谱法同时测量样品中胰岛素和C-肽的量的多重测定(multiplexed assay)。在一些实施方式中，方法包括：(a)在适于产生通过质谱法可检测的一种或多种胰岛素和C-肽离子的条件下使来自样品的胰岛素和C-肽经受电离源；和(b)通过质谱法确定一种或多种胰岛素和C-肽的量。

在一些实施方式中，如果通过本文描述的质谱法确定的胰岛素值大于或等于7μIU/mL，则诊断胰岛素抵抗性。在一些实施方式中，如果通过本文描述的质谱法确定的胰岛素值大于或等于8μIU/mL，则诊断胰岛素抵抗性。在一些实施方式中，如果通过本文描述的质谱法确定的胰岛素值大于或等于9μIU/mL，则诊断胰岛素抵抗性。在一些实施方式中，如果通过本文描述的质谱法确定的胰岛素值大于或等于10μIU/mL，则诊断胰岛素抵抗性。在一些实施方式中，如果通过本文描述的质谱法确定的胰岛素值大于或等于11μIU/mL，则诊断胰岛素抵抗性。在一些实施方式中，如果通过本文描述的质谱法确定的胰岛素值大于或等于12μIU/mL，则诊断胰岛素抵抗性。在一些实施方式中，如果通过本文描述的质谱法确定的胰岛素值大于或等于13μIU/mL，则诊断胰岛素抵抗性。在一些实施方式中，如果通过本文描述的质谱法确定的胰岛素值大于或等于14μIU/mL，则诊断胰岛素抵抗性。在一些实施方式中，如果通过本文描述的质谱法确定的胰岛素值大于或等于15μIU/mL，则诊断胰岛素抵抗性。

在优选实施方式中，如果通过本文描述的质谱法确定的胰岛素值大于或等于15μIU/mL，则诊断胰岛素抵抗性。