[发明专利]利用铁添加剂作为培养基补充剂来检测硫酸盐还原细菌的方法

说明书

根据本发明，提供一种测定包含的硫酸盐还原细菌(SRB)浓度的方法。所述方法包含：在一组测试瓶中制备标准生长培养基；将四水合氯化亚铁(FCTH)添加到每个测试瓶中；将样品部分添加到所述组测试瓶中的第一个中；通过向测试组中的后续小瓶中注入依序排列的前一个小瓶的液体来依序稀释样品部分；以及培育所述组测试瓶，其中所培育的测试瓶中的液体变黑指示存在阈值数目个SRB。

技术领域

本发明涉及结构监测的检测领域。更具体地说，本发明涉及硫酸盐还原细菌(SRB)的监测，所述硫酸盐还原细菌(SRB)引起油工业中使用的基础金属结构发生降解和腐蚀破坏。

背景技术

在石油工业中，微生物菌落可以在基础设备上生长。特别地，由于SRB将硫酸盐还原为硫化物的能力，因此硫酸盐还原细菌(SRB)的生长对于石油工业是有问题的。发现硫化物会造成腐蚀、注入井的堵塞、气体和/或油的变酸以及有毒硫化氢的增加。这些问题由于设备故障、去除硫化物所需的额外设备、控制微生物生长的杀生物剂的补救性使用以及去除或防止硫化铁沉积物使用的额外化学物质而大大提高了生产成本。

传统上，石油工业使用最大或然数(MPN)法来检测现场样品中SRB的生长。MPN法很慢，并且可能需要高达28天才能报告最终读数。这个方法的另一个缺点是其不能检测到低密度的活SRB细胞。因此，SRB可以存在于样品中而没有被检测到，因为其浓度低于MPN法的检测极限。

直接镜检法是一种快速的替代方法，但不能区分活细菌和死细菌。也可以使用其它SRB测试试剂盒；然而，这些试剂盒在测试长度时间过长和缺乏灵敏度方面都有其自身的相关缺点。因此，需要一种SRB检测方法，所述方法易于适应油田的严苛条件并且具有增强的灵敏度，将改善硫酸盐还原细菌和其生长的检测。

关于这些和其它考虑因素，提出了本文所公开的内容。

发明内容

根据本发明，提供了一种测定包含的硫酸盐还原细菌(SRB)的浓度的方法。所述方法包含：在一组测试瓶中制备标准生长培养基；将四水合氯化亚铁(FCTH)添加到每个所述测试瓶中；将样品部分添加到所述组测试瓶中的第一个中；通过向所述测试组中的后续小瓶中注入依序排列的前一个小瓶的液体来依序稀释样品部分；以及培育所述组测试瓶，其中所培育的测试瓶中的液体变黑指示存在阈值数目个SRB。

在一些实施例中，测定根据本发明的SRB的浓度的方法包括在添加FCTH之前向所述组测试瓶中的标准生长培养基中添加铁源。在一些实施例中，以每9毫升标准生长培养基0.01克的剂量添加FCTH。在某一实施方式中，将FCTH以0.5到1毫升溶液添加到8毫升标准生长培养基和1毫升测试样品中。

在其它实施例中，测定根据本发明的SRB的浓度的方法包括调节标准生长培养基的pH以补偿大约7.6的FCTH的添加。在其它实施例中，通过从已经含有混合的测试样品的小瓶中抽出一毫升并且将抽出的毫升注入下一顺序的小瓶中来执行依序稀释的步骤。在一些实施方式中，将那组测试瓶培育5到7天。在一些实施方式中，测试瓶可以在37摄氏度下培育。

本发明还提供一种用于测定测试样品中的硫酸盐还原细菌(SRB)的浓度的测试试剂盒。测试试剂盒的实施例包含一组含有标准生长培养基的测试瓶和包含四水合氯化亚铁(FCTH)的铁添加剂，以添加到测试瓶中。在测定期间，将测试样品添加到所述组测试瓶中的第一个中，并且在所述组的其余小瓶中依序稀释测试样品。将测试瓶与稀释的样品和铁添加剂一起培育后，所述组中任何测试瓶中的液体变黑指示SRB浓度高于阈值水平。

在一些实施例中，小瓶填充有8毫升标准生长培养基和0.5到1毫升FCTH。在一些实施方式中，向第一个测试瓶中注入1毫升测试样品。另外，可以调节标准生长培养基的pH，以将FCTH铁添加剂补偿到大约7.6。

这些和其它方面、特征和优点可从本发明的某些实施例和附图以及权利要求的以下描述中理解。

附图说明