[发明专利]新型肌肉骨骼系统干细胞

权利要求书

1.一种用于诱导分化成肌肉骨骼系统干细胞的分化诱导用培养基组合物，其特征在于，

包含头蛋白、白血病抑制因子、碱性成纤维细胞生长因子、Wnt信号激活剂、细胞外信号调节激酶信号抑制剂以及转化生长因子-β／激活素／结节信号转导抑制剂，上述肌肉骨骼系统干细胞能够分化成骨骼、软骨、肌腱、韧带、肌肉及脂肪，

上述Wnt信号激活剂为CHIR99021（9-溴-7，12-二氢-吡啶并[3'，2'：2，3]叠氮基[4，5-b]吲哚-6（5H）-酮），

上述细胞外信号调节激酶信号抑制剂为PD0325901（N-[（2R）-2，3-二羟基丙氧基]-3，4-二氟-2-[（2-氟-4-碘苯基）氨基]-苯甲酰胺），

上述转化生长因子-β／激活素／结节信号转导抑制剂为SB431542（4-[4-（1，3-苯并二恶唑-5-基）-5-（2-吡啶基）-1H-咪唑-2-基]苯甲酰胺）。

2.一种肌肉骨骼系统干细胞的制备方法，其特征在于，包括在权利要求1所述的用于诱导分化成肌肉骨骼系统干细胞的培养基组合物中培养诱导性多能干细胞的步骤。

3.根据权利要求2所述的肌肉骨骼系统干细胞的制备方法，其特征在于，上述培养是在不改变培养基组成的情况下，培养5继代以上。

4.一种肌肉骨骼系统干细胞，其特征在于，使用权利要求1所述的用于诱导分化成肌肉骨骼系统干细胞的分化诱导用培养基组合物制备而成，上述肌肉骨骼系统干细胞具有如下特征：

a）对于作为外胚层标记的巢蛋白呈阳性；

b）对于作为肌源性卫星标记的Pax7呈阳性；

c）对于作为中胚层标记的α-SMA呈阳性；

d）对于作为多能性标记的LIN28呈阴性；以及

e）对于作为间充质干细胞标记的CD90呈阴性。

5.一种肌肉骨骼系统干细胞的筛选方法，其特征在于，上述肌肉骨骼系统干细胞是使用权利要求1所述的用于诱导分化成肌肉骨骼系统干细胞的分化诱导用培养基组合物制备而成的，

上述肌肉骨骼系统干细胞的筛选方法包括筛选具有如下特征的细胞的步骤：

a）对于作为外胚层标记的巢蛋白呈阳性；

b）对于作为肌源性卫星标记的Pax7呈阳性；

c）对于作为中胚层标记的α-SMA呈阳性；

d）对于作为多能性标记的LIN28呈阴性；以及

e）对于作为间充质干细胞标记的CD90呈阴性。