[发明专利]用于使2’-岩藻糖基乳糖结晶的方法和相关组合物

说明书

本说明书涉及一种用于使寡糖、特别是人乳寡糖、并且更特别是2’‑岩藻糖基乳糖(“2’‑FL”)结晶的方法。本说明书还涉及使用这种方法产生的组合物(例如，结晶产物)。

相关专利申请的交叉引用

本说明书要求2017年3月6日提交的美国临时专利申请号62/467,571；2017年4月21日提交的欧洲专利申请17167564.8；以及2018年2月19日提交的美国临时专利申请号62/632,180的优先权。上述引用的专利申请中的每一个的全文通过引用结合到本说明书中。

技术领域

本说明书涉及一种用于使寡糖、特别是人乳寡糖、并且更特别是2’-岩藻糖基乳糖(“2’-FL”)结晶的方法。本说明书还涉及使用这种方法产生的组合物(例如，结晶产物)。

背景技术

人乳寡糖对营养和治疗是重要的。最重要的人乳寡糖之一是2’-岩藻糖基乳糖(也称为2’-O-岩藻糖基乳糖或“2’-FL”)。这种寡糖是在人母乳中发现的最丰富的寡糖，并且据信具有若干有益的生物学作用，包括益生元、抗细菌、抗病毒、免疫系统增强和脑发育增强作用。此类益处使得2’-FL成为包括在食品、膳食补充剂和药物中、且特别是婴儿配方食品中的潜在有吸引力的成分。然而，开发用于大规模生产2’-FL的经济上可行的方法仍然是一个挑战。

用于合成2’-FL的许多最近方法涉及微生物发酵过程，所述过程由乳糖产生2’-FL。尽管已经关于这种方法取得了成功，但此类方法通常产生复杂的产物混合物，所述产物混合物通常包含其他成分，如乳糖、除所希望的2’-FL以外的寡糖(例如，二岩藻糖基乳糖(“DiFL”))、单糖、氨基酸、多肽、蛋白质、单价和二价盐、有机酸、核酸等。因此，仍然需要提供可用的2’-FL产物的有效的、可靠的且经济上可行的下游纯化方法。

用于纯化2’-FL的一种技术是结晶。然而，由于其独特的结晶性质，常用的冷却结晶技术通常不能用于2’-FL。虽然2’-FL的饱和水糖浆在低温下具有低粘度(这通常表明结晶将是直接的)，但即使高度过饱和的水性2’-FL糖浆在低温下也通常是稳定的。

为了克服这一问题，本领域的一些人报告了涉及添加有机溶剂以促使结晶的技术。参见，例如，Kuhn,R.,等人,Chemische Berichte[德国化学学报],第88(8)卷,第1135-1146页(1955)；Kuhn,R.,等人,Chemische Berichte[德国化学学报],第89(11)卷,第2513页(1956)；WO 2011/150939；WO 2015/188834；以及WO 201695924。然而，使用有机溶剂来使2’-FL结晶存在许多潜在的缺点。这些包括例如有机溶剂本身的成本。有机溶剂也可能产生有害的排放物、废物和/或污染。在结晶后通常需要特殊设备来回收溶剂。在一些情况下，存在与这种溶剂回收相关的溶剂损失。对于一些溶剂，由于爆炸或其他安全原因，也需要特殊设备。并且如果残余溶剂留在结晶产物中，则溶剂的使用也可能是问题。即使痕量水平的一些有机溶剂也可能对味道、气味、颜色和/或食品安全性产生不利影响。

因此，对于用于纯化2’-FL的有效的、可靠的且经济上可行的下游方法、特别是避免对有机溶剂的需要的水性结晶仍然存在需要。

发明内容

简言之，本说明书总体上披露了一种用于使2’-FL结晶的方法，以及使用这种方法产生的组合物。

具体地说，本说明书部分地披露了一种用于由包含2’-FL和至少一种其他碳水化合物的水性起始溶液制备结晶的2’-FL的方法。

在一些实施例中，所述方法包括将所述起始溶液浓缩至对于2’-FL而言的过饱和状态，并且然后在使所述过饱和溶液经受大于60℃的温度的同时从所述过饱和溶液中沉淀出2’-FL晶体。在这种方法中，在所述2’-FL晶体的沉淀过程中，所述过饱和溶液包含不大于1％(按重量计)的有机溶剂。