[发明专利]用于转导和扩增淋巴细胞以及调节其活性的方法及组合物

权利要求书

1.一种复制缺陷型重组反转录病毒颗粒在制备用于以基因方式修饰受试者的静息T细胞或静息NK细胞的试剂盒中的用途，其中所述试剂盒的用途包含：使所述T细胞或NK细胞离体与所述复制缺陷型重组反转录病毒颗粒接触，其中所述复制缺陷型重组反转录病毒颗粒包含表面上的假型组件及所述表面上的膜结合T细胞活化组件，其中所述接触有助于利用所述复制缺陷型重组反转录病毒颗粒转导所述T细胞或NK细胞，由此产生经基因方式修饰的T细胞或NK细胞，且其中所述接触进行1小时至12小时之间。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述接触进行1小时至6小时之间。

3.根据权利要求1所述的用途，其中所述膜结合T细胞活化组件为抗CD3 scFvFc。

4.根据权利要求1所述的用途，其中所述复制缺陷型重组反转录病毒颗粒包含多核苷酸，所述多核苷酸包含可操作地连接至在T细胞和/或NK细胞中具有活性的启动子的一个或多个转录单元，其中所述一个或多个转录单元编码包含嵌合抗原受体(CAR)的第一多肽和包含T细胞淋巴增生性组件的第二多肽，且其中所述经基因方式修饰的T细胞和/或NK细胞能够在不存在针对所述CAR的ASTR的靶标且不存在外源性细胞因子的情况下在离体培养物中存活至少7天。

5.根据权利要求4所述的用途，其中所述T细胞淋巴增生性组件包含嵌合细胞因子受体。

6.根据权利要求5所述的用途，其中所述嵌合细胞因子受体包含连接至IL-7受体α的IL-7，或其保留促进T细胞和/或NK细胞增生的能力的片段，且其中所述嵌合细胞因子受体是组成性活性的。

7.根据权利要求6所述的用途，其中所述嵌合细胞因子受体包含共价连接至能够结合IL-7的IL-7受体的功能性胞外片段、IL-7受体跨膜域及IL-7受体信号传导域的IL-7。

8.根据权利要求4所述的用途，其中所述CAR为MRB-CAR。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的用途，其中所述复制缺陷型重组反转录病毒颗粒为慢病毒颗粒，且其中所述经基因方式修饰的细胞为经基因方式修饰的T细胞。

10.一种经基因方式修饰的T细胞或NK细胞，其通过根据包含使静息T细胞和/或静息NK细胞离体与复制缺陷型重组反转录病毒颗粒接触的方法转导静息T细胞和/或静息NK细胞来制得，其中所述复制缺陷型重组反转录病毒颗粒包含在其表面上的假型组件及在其表面上的膜结合T细胞活化组件，其中所述接触有助于利用所述复制缺陷型重组反转录病毒颗粒转导所述静息T细胞和/或NK细胞，由此产生经基因方式修饰的T细胞和/或NK细胞，且其中所述接触进行1小时至12小时之间。

11.根据权利要求10所述的经基因方式修饰的T细胞或NK细胞，其中所述接触进行1小时至6小时之间。

12.根据权利要求10所述的经基因方式修饰的T细胞或NK细胞，其中所述膜结合T细胞活化组件为抗CD3 scFvFc。

13.根据权利要求10所述的经基因方式修饰的T细胞或NK细胞，其中所述复制缺陷型重组反转录病毒颗粒包含多核苷酸，所述多核苷酸包含可操作地连接至在T细胞和/或NK细胞中具有活性的启动子的一个或多个转录单元，其中所述一个或多个转录单元编码包含嵌合抗原受体(CAR)的第一多肽和包含T细胞淋巴增生性组件的第二多肽，且其中所述经基因方式修饰的T细胞和/或NK细胞能够在不存在针对所述CAR的ASTR的靶标且不存在外源性细胞因子的情况下在离体培养物中存活至少7天。

14.根据权利要求13所述的经基因方式修饰的T细胞或NK细胞，其中所述CAR为MRB-CAR。