[发明专利]用于检测早期胰腺癌的测定

说明书

本文提供了检测胰腺癌，尤其是早期胰腺癌的方法，其包括测量生物标记物组TNC‑FN III‑C、TFPI和CA19‑9的表达。所述表达可以通过ELISA(例如多重ELISA)测定。本文进一步提供了治疗被鉴定为患有胰腺癌的受试者的方法。

本申请要求2017年2月24日提交的美国临时专利申请号62/463,348的权益，其全部内容通过引用并入本文。

背景

本发明是在美国国立卫生研究院授予的授权号为CA111302的政府支持下完成的。政府拥有本发明的某些权利。

1.发明领域

本发明总体上涉及分子生物学和医学领域。更具体地，其涉及用于胰腺癌的早期检测的生物标记物。

2.相关技术的描述

在美国，胰腺导管腺癌(PDAC)是癌症死亡的第四大主要原因，当手术切除不再是有疗效的选项时，大多数患者表现为局部晚期疾病(～30％)或远处转移(～50％)(Conlon等人,1996；Rahib等人,2014)。在较早的、可切除的阶段诊断PDAC的影响估计可将5年生存率提高到30％或更高，这表明，如果可以及早诊断出该疾病，则PDAC患者的死亡率将显著降低(Chu等人,2010)。

不幸的是，没有可检测早期PDAC的生物标记物。当前的金标准血液基生物标记物CA 19-9缺乏疾病早期检测所需的特异性(Chu等，2010)。鉴定PDAC生物标记物的尝试未能产生可经受多重盲法验证(multiple blinded validations)并改善CA19-9的单个标记物或多个标记物的组合。因此，迫切需要新的生物标记物组(biomarker panel)来改善当前的金标准生物标记物以用于PDAC的早期检测。

发明内容

本公开的某些实施方案涉及用于检测癌症，特别是胰腺癌的早期检测的生物标记物组。在第一实施方案中，提供了一种用于测量抗原TNC-FN III-C、TFPI和CA19-9的表达的测定，其包括使多种抗原与抗TNC-FN III-C抗体、抗-TFPI抗体和抗CA19-9抗体接触形成抗原-抗体复合物；并使用与每种抗体明显结合的可检测部分检测抗原-抗体复合物，从而测量抗原TNC-FN III-C、TFPI和CA19-9的表达。在某些方面，所述测定是体外或体内测定。

在一些方面，所述多种抗原从生物学样本获得。在某些方面，所述生物学样本是组织、手术或活检标本、石蜡包埋的组织、冷冻的组织印记、外周血、尿液或细针抽吸物。在具体的方面，所述样本是血液样本，例如血浆样本。在一些方面，所述生物学样本获自具有癌症风险的受试者，例如具有遗传癌症家族史的受试者。在具体的方面，所述生物学样本获自50岁以上的受试者，例如60、65、70、75岁或更高。在一些方面，所述受试者先前未被诊断出患有癌症。在某些方面，尚未对所述受试者进行糖尿病和/或慢性胰腺炎的测试。在其他方面，已经对所述受试者进行了测试并且确定其没有糖尿病和/或慢性胰腺炎。

在某些方面，检测进一步定义为进行酶联免疫吸附测定(ELISA)、蛋白质印迹或免疫组织化学。在一些方面，进行一个、两个或三个ELISA。在具体的方面，所述ELISA是夹心ELISA。在具体的方面，所述夹心ELISA是多重ELISA，其中同时检测两种或三种抗原。在一些方面，所述抗体缀合至表面。在某些方面，所述方法进一步包括在形成抗原-抗体复合物之后进行洗涤以除去不在抗原-抗体复合物中的抗原。在一些方面，所述方法进一步包括在洗涤步骤之后添加对三种抗原中的每一种特异的检测抗体。在具体的方面，所述检测抗体是生物素化的。因此，在一些方面，检测包括添加链霉亲和素缀合的荧光团并测量该荧光团。

在一些方面，所述样本是未稀释的。在其他方面，将样本稀释至少50倍，例如至少75倍、100倍、150倍、200倍或更高。