[发明专利]特异性地结合MUC1的抗体及其用途

说明书

本发明涉及特异性地结合粘蛋白1(MUC1)的抗MUC1抗体及其用途，并且更具体地，涉及抗MUC1抗体或其抗原结合片段，包含所述抗体或其抗原结合片段的抗体‑药物缀合物或双特异性抗体，一种包含所述缀合物或双特异性抗体的用于预防或治疗癌症的药物组合物，以及编码所述抗体或其抗原结合片段的核酸，均携带所述核酸的载体和宿主细胞，以及使用所述载体和宿主细胞制备抗MUC1抗体或其抗原结合片段的方法。根据本发明，特异性地结合MUC1的抗体或其抗原结合片段示出对MUC1的显著亲和力和结合力，并且其中抗体或其抗原结合片段与药物缀合的抗体‑药物缀合物可以特异性地结合表达MUC1的细胞，以特异性或选择性地高效转运所述药物。因此，根据本发明的抗MUC1抗体和抗体‑药物缀合物可以有效地应用于MUC1相关疾病例如癌症的治疗。

技术领域

本发明涉及特异性地结合粘蛋白1(MUC1)的抗MUC1抗体及其用途，并且更具体地涉及抗MUC1抗体或其抗原结合片段，包含所述抗体或其抗原结合片段的抗体-药物缀合物或双特异性抗体，一种包含所述抗体或其抗原结合片段的用于预防或治疗癌症的药物组合物，编码所述抗体或其抗原结合片段的核酸，包含所述核酸的载体和宿主细胞，以及使用所述核酸制备抗MUC1抗体或其抗原结合片段的方法。

背景技术

粘蛋白1(MUC1)是跨膜糖蛋白，包括许多糖基化的细胞外结构域。MUC1在细胞表面上具有200nm至500nm的长度，并且位于正常上皮细胞的顶膜中。MUC1在许多器官的线性或腔上皮细胞中表达，所述器官例如乳房、胃、食道、胰腺、尿道、肺、肾和胆囊。在正常组织中，MUC1的带负电荷的碳水化合物形成物理屏障，用于保护基底上皮免于脱水、pH变化、花粉和微生物。

MUC1基因编码单个转录物。翻译后，MUC1在位于SEA结构域(海胆精子蛋白肠激酶和聚集蛋白结构域)的GSVVV基序中被自动切割。它们由两个肽片段组成，即N末端亚基(MUC1-N)和C末端亚基(MUC1-C)。

MUC1-N末端亚基具有可变数目的串联重复，并且由PTS(富含脯氨酸/苏氨酸/丝氨酸)结构域和SEA结构域组成。MUC1-C末端亚基由58个氨基酸的胞外结构域(ECD)、28个氨基酸的跨膜结构域(TMD)和72个氨基酸的胞质结构域(CD)组成。MUC1在细胞外结构域中引起广泛的O-连接的糖基化。取决于N-糖基化模式的程度，MUC1-C的大小为23kDa至25kDa，并且当N-糖基化缺陷时为17kDa。一旦首次产生MUC1，与细胞结合的部分和待释放至细胞外部的部分通过非共价相互作用结合。在这种情况下，切割是由称为“脱落酶”的酶引起的。通过刺激细胞因子如IFN-γ和TNF-α分离MUC1复合物。MUC1-N由酶释放，所述酶包括TNF-α转化酶(TACE)和基质金属蛋白酶(MMP)。这些酶将MUC1-C的ECD切割成两个片段。随着癌症的进展，细胞外片段从癌细胞分离并漂浮在身体的血液中，而细胞结合的片段连续地保持与癌细胞结合。MUC1对于癌细胞的生长是重要的，因为它通过结合与癌细胞增殖相关且存在于其他癌细胞中的细胞膜蛋白而发送连续细胞增殖信号，以在癌细胞增殖中起关键作用。此外，此片段与癌细胞具有相同的命运，直到癌细胞长好和消除，因此此片段充当癌症检测的良好靶标并且充当关于癌症消除的关键生物标记物。此外，与MUC1的其他部分不同，已知此片段是唯一未被糖基化的部分，并且被认为是区分癌细胞的MUC1与正常细胞的MUC1的独特部分。因此，诸位发明人基于以下观点开发了本发明的抗体：此片段与MUC1细胞结合并共享癌症的命运并且可以区分正常细胞的MUC1与癌细胞的MUC1，能够作为针对抗体的最佳抗原。

同时，通过接头将细胞毒性药物与抗体结合，获得抗体-药物缀合物(ADC)。由于单克隆抗体具有靶标特异性，抗体-药物缀合物中的药物可以被递送至表达抗原/靶标的肿瘤，所述抗原/靶标被具有选择性靶向能力的单克隆抗体识别。理想的是抗体-药物缀合物在给药后在血液中呈前药形式，应该是无毒的，并且当抗体结合靶肿瘤抗原并且然后内化到癌细胞中时，药物以活性形式释放并杀死癌细胞。