[发明专利]用于治疗癌症的组合物和方法

说明书

本文描述了含有编码嵌合抗原受体(CAR)和检查点抑制剂的核酸的基因修饰的组合物，以及使用该组合物治疗癌症的方法。

相关申请的交叉引用

根据35U.S.C§119(e)，本申请包括要求2017年4月19日提交的美国临时申请号62/487,358的优先权，以引用的方式将其整体并入在此。

关于联邦政府资助的研究或开发的声明

本发明是在美国国立卫生研究院授予的Grant No.AI068978和No.EB017206的政府支持下完成的。美国政府拥有本发明的某些权利。

技术领域

本文描述了包含含有嵌合抗原受体(CAR)和检查点抑制剂(checkpointinhibitor，CPI)的T细胞的组合物，以及使用该组合物治疗癌症的方法。

背景技术

将本文中的所有出版物以引用的方式并入，其程度如同将每个单独的出版物或专利申请具体且单独地指示为以引用的方式并入一样。下面的描述包括对于理解本发明可能有用的信息。这并不是承认本文提供的任何信息都是现有技术或者与目前所请求保护的发明相关，或者任何明确或隐含地引用的出版物都是现有技术。

过继细胞转移(adoptive cell transfer，ACT)是一种用于癌症的免疫疗法模式，已在血液恶性肿瘤和恶性黑色素瘤的治疗中展示出显著的成功。一种特别有效的ACT形式(使用表达嵌合抗原受体(CAR)的基因修饰T细胞来特异性靶向肿瘤相关抗原(TAA)，例如CD19和GD2)在治疗例如B细胞恶性肿瘤和神经母细胞瘤的疾病的临床试验中显示出令人鼓舞的结果。

与天然存在的T细胞受体(TCR)不同，CAR是由融合有细胞内T细胞信号传导结构域和共刺激结构域的细胞外抗原识别结构域组成的人工受体。CAR可以不依赖于主要组织相容性类别(MHC)的方式直接并选择性地识别细胞表面TAA。尽管CAR T细胞疗法在血液恶性肿瘤患者中取得了有记载的成功，但在实体瘤中仅观察到不太大的响应。这可能部分归因于在实体瘤中免疫抑制性微环境的建立。此类环境涉及多种内在抑制性途径的上调，所述内在抑制性途径由与肿瘤中它们的同源(cognate)配体反应的T细胞中的抑制性受体(IR)的表达增加介导。

到目前为止，已经在T细胞中表征了若干种IR，例如CTLA-4、T细胞Ig粘蛋白3(Tcell Ig mucin-3，TIM-3)、淋巴细胞活化基因3(LAG-3)和程序性死亡1(PD-1)。这些分子在慢性疾病和癌症中T细胞持续激活后上调，并且它们促进T细胞功能障碍和耗竭，从而导致肿瘤逃避免疫检测。与其它IR不同，PD-1在T细胞激活后不久即上调，转而通过与它的两个配体(PD-L1或PD-L2)相互作用来抑制T细胞效应物功能。PD-L1在T细胞、B细胞、巨噬细胞和树突细胞(DC)上组成性表达。还证实PD-L1在种类繁多的实体瘤中大量表达。相反，正常组织中PD-L1的表达是不可检测的。由于其在免疫抑制中的关键作用，PD-1是近期研究的焦点，旨在中和其对T细胞的负面影响并增强抗肿瘤反应。临床研究表明，PD-1阻断显著增强结肠癌、肾癌和肺癌以及黑色素瘤中的肿瘤消退。

因此，本发明的目的是提供调节肿瘤诱导的CAR T细胞机能减退、并且可以逆转或抑制抑制性受体的组合物。

本发明的另一目的是提供制备和使用调节或避免肿瘤诱导的CAR T细胞机能减退的组合物的方法。

发明内容

结合系统、组合物和方法对如下实施方式及其方面进行描述和说明，其意在示例和说明，而并不对范围进行限制。

提供了细胞，所述细胞包含编码嵌合抗原受体(CAR)和检查点抑制剂(CPI)二者的核酸，或者包含编码CAR的核酸和编码CPI的核酸。在多种实施方式中，提供了分泌检查点抑制剂的CAR-T细胞。