[发明专利]用于治疗视网膜疾病的感光细胞在审
| 申请号: | 201880021741.4 | 申请日: | 2018-02-08 |
| 公开(公告)号: | CN110520139A | 公开(公告)日: | 2019-11-29 |
| 发明(设计)人: | B·E·鲁比诺夫;M·戈尔什坦;H·坎纳;A·奥伯伦斯基;E·班宁 | 申请(专利权)人: | 哈达西特医疗研究服务和开发有限公司 |
| 主分类号: | A61K35/30 | 分类号: | A61K35/30;C12N5/071;C12N5/079;C12N5/0797 |
| 代理公司: | 11256 北京市金杜律师事务所 | 代理人: | 陈文平;刘盈盈<国际申请>=PCT/IL |
| 地址: | 以色列*** | 国省代码: | 以色列;IL |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 感光细胞 细胞群 | ||
1.一种产生感光细胞的方法,其包括(a)在引起感光细胞的条件下,在含有烟酰胺的培养基中培养干细胞。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述培养基包含至少0.5mM烟酰胺。
3.根据权利要求1所述的方法,其还包括(b)在包含选自以下的至少一种试剂或试剂的组合的培养基中培养步骤(a)中产生的细胞:GSK3抑制剂、Wnt抑制剂、bFGF、HSA或IGF。
4.根据权利要求3所述的方法,其还包括在步骤(b)的所述培养之后分离感光细胞。
5.根据权利要求3所述的方法,其还包括在步骤(b)的所述培养之后扩增所述细胞。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法,其中步骤(a)的所述培养是在非贴壁条件下进行。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法,其中步骤(b)的所述培养是在非贴壁条件下进行。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法,其中步骤(b)的所述培养基包含以下中的一种或多种:
(i)烟酰胺和Wnt抑制剂;
(ii)烟酰胺和bFGF;
(iii)烟酰胺和IGF;
(iv)烟酰胺、IGF和GSK3抑制剂;
(v)烟酰胺、bFGF和Wnt抑制剂;
(vi)烟酰胺、Wnt抑制剂和HSA;
(vii)烟酰胺、bFGF和HSA;
(viii)烟酰胺、bFGF、Wnt抑制剂和HSA;或
(ix)烟酰胺和HSA。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法,其中步骤(a)的所述培养至少进行3天。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法,其中步骤(b)的所述培养至少进行1周。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法,其中步骤(b)的所述培养基基本上不含激活素A。
12.根据权利要求1-10中任一项所述的方法,其中步骤(b)的所述培养基基本上不含TGFβ超家族成员。
13.根据权利要求1-10中任一项所述的方法,在不存在所述TGFβ超家族成员的情况下进行,其允许分化成所述感光细胞。
14.根据权利要求1-11中任一项所述的方法,其中在步骤(a)的所述培养之前,将所述干细胞在饲养细胞条件培养基中培养。
15.根据权利要求1-11中任一项所述的方法,其中在步骤(a)的所述培养之前,将所述干细胞在层粘连蛋白上的无饲养细胞系统中培养。
16.根据权利要求3所述的方法,其还包括在步骤(b)之后冻存所述感光细胞。
17.根据权利要求16所述的方法,其中所述冻存在选自以下的培养基中进行:90%人血清/10%DMSO、CryoStor 10%、CryoStor 5%、CryoStor 2%、Stem Cellbanker和PrimeFreezIS。
18.根据权利要求1-7中任一项所述的方法,其中所述干细胞包括人胚胎干细胞(ESC)或诱导的多能干细胞(iPSC)。
19.根据权利要求1-18中任一项所述的方法,其中步骤(a)的所述培养基基本上不含Wnt抑制剂、bFGF、HSA、IGF和/或GSK3抑制剂。
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