[发明专利]脂质和生育酚的综合和定量分析

说明书

本文描述了通过质谱法测定样品中来自一种或多种脂质类别的一种或多种脂质种类的存在、不存在或量的方法。一种或多种脂质类选自蜡酯(WE)、角鲨烯(SQ)、三酰基甘油(TAG)、二酰基甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇酯(CE)、胆固醇(CH)及其组合。该方法包括a)在适合于从一种或多种脂质种类中的每一种产生一种或多种可通过质谱法检测的离子的条件下使样品经受电离源；b)通过质谱法测量来自一种或多种脂质种类中的每一种的一种或多种离子的量；和c)使用测量的一种或多种离子的量来确定样品中一种或多种脂质种类中的每一种的存在、不存在或量。

相关申请的交叉引用

本申请要求2017年3月31日提交的美国临时专利申请No.62/479,534、2017年5月31日提交的美国临时专利申请No.62/512,776、2017年9月14日提交的美国临时专利申请No.62/558,415、2017年11月30日提交的美国临时专利申请No.62/592,639的权益，其全部内容通过引用并入本文。

背景

提供以下用于描述本发明背景的信息以帮助理解本发明，并且不承认其构成或描述本发明的现有技术。

皮脂是由脂质细胞(皮脂腺的特化细胞)产生的富含脂质的分泌物。在人体中，皮脂覆盖皮肤表面，并有助于抗菌防御、保水、光保护和伤口愈合。皮脂脂质组(lipidome)由脂质的复杂混合物组成。皮脂脂质组合物在物种之间不同，可能是由于各种功能要求。人体皮脂脂质不仅包括游离脂肪酸(FFA)、胆固醇(CH)、胆固醇基/胆固醇酯(CE)和二酰基甘油酯和三酰基甘油(DAG和TAG)，还包括皮脂独有的蜡酯(WE)和角鲨烯(SQ)。除了这些脂质外，皮脂还含有脂溶性分子，如生育酚。皮脂表征已经涉及薄层色谱以分离脂质类别，然后在不鉴定个体脂质种类的情况下测定每个类别中的大部分脂肪酸组成(Stewart等人,J InvestDermatol.1986；87(6):733-6)。最近，结合液相色谱(LC)和质谱(MS)的方法已被用于表征皮脂脂质(Camera等人,J Lipid Res.2010；51(11)；3377-88)，但这些方法仅报告了总和组成并不鉴定脂质种类的脂肪酸组成。此外，这些方法仅提供相对定量，并且皮脂脂质组的脂肪酸组成不能跨脂质类别进行定量。此外，该方法需要预先分离或纯化步骤。在这里，我们提出了同时鉴定皮脂中主要脂质种类的脂肪酸组成和测量这些分子和脂溶性生育酚的绝对浓度的方法。

本文描述了用于检测和定量皮脂样品中的脂质和生育酚的方法和测定。

概述

在本发明的第一方面，一种通过质谱法测定样品中来自选自蜡酯(WE)、角鲨烯(SQ)、三酰基甘油(TAG)、二酰基甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇酯(CE)、胆固醇(CH)及其组合的一种或多种脂质类别的一种或多种脂质的存在、不存在或量的方法包括多个步骤。这些步骤包括在适于从一种或多种脂质种类中的每一种产生一种或多种可通过质谱法检测的离子的条件下使样品经受电离源；通过质谱法测量来自一种或多种脂质种类中的每一种的一种或多种离子的量；和使用测量的一种或多种离子的量来确定样品中一种或多种脂质种类中的每一种的存在、不存在或量。

在本发明的第二方面，通过质谱法测定样品中一种或多种脂质种类和一种或多种生育酚的存在、不存在或量的方法包括多个步骤。所述一种或多种脂质种类来自一种或多种脂质类别，其选自蜡酯(WE)、角鲨烯(SQ)、三酰基甘油(TAG)、二酰基甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇酯(CE)、胆固醇(CH)、生育酚(TOC)及其组合。一种或多种生育酚选自α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚及其组合。所述步骤包括在适于从一种或多种脂质种类和一种或多种生育酚中的每一种产生一种或多种可通过质谱法检测的离子的条件下使样品经受电离源；通过质谱法测量来自一种或多种脂质种类和一种或多种生育酚中的每一种的一种或多种离子的量；和使用测量的一种或多种离子的量来确定样品中一种或多种脂质种类和一种或多种生育酚中的每一种的存在、不存在或量。