[发明专利]核酸杂交检测在审
| 申请号: | 201880019334.X | 申请日: | 2018-02-08 |
| 公开(公告)号: | CN110785498A | 公开(公告)日: | 2020-02-11 |
| 发明(设计)人: | 斯蒂芬·Y·周;丁惟;张玙璠;李骥;戚骥 | 申请(专利权)人: | ESSENLIX公司 |
| 主分类号: | C12Q1/6834 | 分类号: | C12Q1/6834;C12Q1/686 |
| 代理公司: | 11129 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 | 代理人: | 吴泳历 |
| 地址: | 美国新泽西州*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 特异性结合 靶标核酸 试剂储存 样品接触 靶标 扩增 位点 特异性核酸探针 均相核酸检测 方法和装置 特异性核酸 表面清洗 读取装置 检测剂 分析 | ||
1.一种用于进行均相核酸检测分析的方法,包含:
(a)获得包含第一板和第二板的QMAX装置,其中
所述第一板和所述第二板各自包含用于接触含有一种或多种靶
标核酸的样品的样品接触区域;
所述第一板在其样品接触区域上包含结合位点,所述结合位点包含:
(i)表面扩增表面;以及
(ii)靶标特异性核酸探针,其被固定在所述扩增表面上并且特异性结合所述靶标核酸的一部分;以及
所述第二板包含样品接触区域,所述样品接触区域包含
试剂储存位点,所述试剂储存位点包含与所述靶标核酸的另一部分特异性结合的靶标特异性核酸检测剂;(b)当所述板处于开放构造时,将所述样品沉积在所述板中的一个或两个上;
(c)将所述板闭合成闭合构造;以及。
(d),在(c)之后,当所述板仍然处于所述闭合构造并且没有任何清洗步骤时,通过读取装置读取所述样品接触区域以产生信号图像来检测所述靶标核酸;
其中:配置(i)所述闭合构造中的样品的厚度,(ii)所述闭合构造中的样品中溶解的标记的浓度,以及(iii)邻近依赖性扩增表面的扩增因子,使得通过靶标核酸间接结合至核酸探针的标记在不洗掉未结合至所述表面扩增表面的任何生物材料或标记的情况下是可见的;
其中所述构造之一是开放构造,其中所述两个板的内表面之间的平均间距是至少200μm;以及
其中所述构造中的另一个是闭合构造,其中所述样品的至少一部分在所述两个板之间并且所述板的内表面之间的平均间距小于200μm。
2.一种用于分析均质样品的装置,包含:
第一板、第二板和结合位点,其中
(a)所述第一板和所述第二板可相对于彼此移动成不同的构造,并且在其各自的表面上具有用于接触包含靶标分析物的样品的样品接触区域,
(b)所述第一板上的所述样品接触区域具有结合位点,所述结合位点包含:
(i)邻近依赖性信号扩增层,和
(ii)靶标特异性核酸探针,其附着于所述邻近依赖性信号扩增层并结合靶标核酸的一部分;
(c)所述第二板上的所述样品接触区域包含试剂储存位点,所述试剂储存位点包含与所述靶标核酸的另一部分结合的靶标特异性核酸检测剂;
其中所述构造之一是开放构造;
其中所述构造中的另一个是闭合构造,其中所述样品的至少一部分在所述两个板之间;以及
其中,配置所述闭合构造中的样品的厚度、所述闭合构造中的样品中溶解的标记的浓度和所述邻近依赖性信号扩增层的扩增因子,使得任何间接结合所述靶标特异性核酸探针的标记在不洗掉未结合的标记的情况下是可见的。
3.一种设备,包含热循环仪和权利要求2所述的装置。
4.一种设备,包含热循环仪、权利要求2所述的装置和用于实时PCR的读取器。
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