[发明专利]具有变异衣壳的腺相关病毒病毒体及其使用方法

权利要求书

1.一种重组腺相关病毒(rAAV)病毒体，所述重组腺相关病毒(rAAV)病毒体包含：

a)变异AAV衣壳蛋白，其中所述变异AAV衣壳蛋白包含式I-VI中任一式的异源肽的插入，并且其中与包含相应亲本AAV衣壳蛋白的对照AAV病毒体对视网膜细胞的感染性相比，所述变异衣壳蛋白赋予增强的视网膜细胞感染性；以及

b)包含编码异源基因产物的核苷酸序列的异源核酸。

2.根据权利要求1所述的rAAV病毒体，其中与包含相应亲本AAV衣壳蛋白的对照AAV病毒体对视网膜细胞的感染性相比，所述rAAV病毒体表现出增强至少5倍的视网膜细胞感染性。

3.根据权利要求1所述的rAAV病毒体，其中与包含相应亲本AAV衣壳蛋白的AAV病毒体对视网膜细胞的感染性相比，所述rAAV病毒体表现出增强至少10倍的视网膜细胞感染性。

4.根据权利要求1所述的rAAV病毒体，其中所述异源肽的插入置换所述亲本AAV衣壳蛋白的5个氨基酸至20个氨基酸的连续段。

5.根据权利要求1所述的rAAV病毒体，其中插入位点在对应于AAV2的VP1的氨基酸570和611的氨基酸之间，或者另一种AAV血清型的衣壳蛋白中的相应位置处。

6.根据权利要求4所述的rAAV病毒体，其中所述插入位点位于对应于AAV2的VP1的氨基酸587和588的氨基酸之间，或另一种AAV血清型的衣壳蛋白中的相应位置处；或者，其中所述插入位点位于对应于AAV2的VP1的氨基酸585和598的氨基酸之间，或者位于另一种AAV血清型的衣壳蛋白中的相应位置处。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的rAAV病毒体，其中基因产物是干扰RNA或适体。

8.根据权利要求1-6中任一项所述的rAAV病毒体，其中所述基因产物是多肽。

9.根据权利要求8所述的rAAV病毒体，其中所述多肽是神经保护多肽、抗血管生成多肽，或增强视网膜细胞的功能的多肽。

10.根据权利要求8所述的rAAV病毒体，其中所述多肽是选自II型CRISPR/Cas多肽、V型CRISPR/Cas多肽和VI型CRISPR/Cas多肽的RNA指导的内切核酸酶。

11.根据权利要求10所述的rAAV病毒体，其中所述RNA指导的内切核酸酶是无酶促活性的II型CRISPR/Cas多肽。

12.根据权利要求10所述的rAAV病毒体，其中所述基因产物是RNA指导的内切核酸酶和指导RNA。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的rAAV病毒体，其中所述异源肽是式I的肽：LA(L/N)(I/Q)(Q/E)(D/H)(S/V)(M/K)(R/N)A(SEQ ID NO:136)。

14.根据权利要求1-12中任一项所述的rAAV病毒体，其中所述异源肽包含(21)LALIQDSMRA(SEQ ID NO:35)或(22)LANQEHVKNA(SEQ ID NO:2)。