[发明专利]用于基因组编辑的核酸和方法

权利要求书

1.合成核酸，其包含第一核酸序列，所述第一核酸序列包含与SEQ ID NO：1的核酸序列或其部分具有至少82％相同性的1000个连续核苷酸；其中所述第一核酸序列编码Argonaute多肽或其功能性片段。

2.权利要求1的合成核酸，其中所述第一核酸包含SEQ ID NO：1的核酸序列。

3.权利要求1或2的合成核酸，其中所述第一核酸包含编码Argonaute多肽或其功能性片段的编码区。

4.权利要求3的合成核酸，其进一步包含与所述编码区可操作连接的启动子。

5.权利要求1至4中任一项的合成核酸，其进一步包含核定位信号(NLS)序列。

6.一种组合物，其包含权利要求1至5中任一项的合成核酸。

7.权利要求6的组合物，其进一步包含长度为18至30个核苷酸的向导寡核苷酸，其中所述向导寡核苷酸与位于哺乳动物细胞基因组中的靶序列具有至少90％相同性。

8.权利要求7的组合物，其中所述哺乳动物细胞是人细胞。

9.权利要求7-8中任一项的组合物，其进一步包含供体核酸，所述供体核酸包含(i)期望的核酸序列、(ii)5'-侧翼序列、和(iii)3'-侧翼序列，其中所述5'-侧翼序列和所述3'-侧翼序列的每一个独立地包含至少10个与所述向导序列相同的连续核苷酸。

10.权利要求7至9中任一项的组合物，其中所述合成核酸、所述向导寡核苷酸和所述供体核酸是分开的核酸片段。

11.权利要求7-10中任一项的组合物，其中所述合成核酸、所述向导寡核苷酸和所述供体核酸不共价连接。

12.权利要求6-11中任一项的组合物，其中所述组合物是药物组合物，所述药学组合物包含药学上可接受的赋形剂、稀释剂、添加剂或载体。

13.一种试剂盒，其包含权利要求1至5中任一项的合成核酸或权利要求6至12中任一项的组合物。

14.一种编辑细胞基因组的方法，包括：

a)提供包含基因组的细胞或生物体；

b)使所述细胞或生物体接触：

(i)权利要求1至5中任一项的合成核酸，和

(ii)长度为18至30个核苷酸的向导寡核苷酸，其与基因组中的靶序列具有至少90％相同性。

15.权利要求14的方法，其中(b)所述的接触还包括使所述细胞或生物体接触，

(iii)供体序列，其包含

期望的核酸，

5'侧翼序列，和

3'侧翼序列，

其中所述5'-侧翼序列和所述3'-侧翼序列的每一个位于所述期望的核酸序列的相对侧，并独立地包含至少8个与所述向导序列的一部分相同的连续核苷酸。

16.权利要求15的方法，其中所述5'-侧翼序列和所述3'-侧翼序列的长度为10-50个核苷酸。

17.权利要求15或16的方法，其中所述5'-侧翼序列和3'-侧翼序列各自包含至少10个与所述靶序列相同的核苷酸。

18.权利要求15-17中任一项的方法，其中所述5'和3'侧翼序列是不同的序列。

19.权利要求14-18中任一项的方法，其中所述靶序列的长度为16至30个核苷酸。