[发明专利]细胞培养方法以及细胞培养系统

说明书

本发明提供细胞培养方法及细胞培养系统，以接触角为84°以下、并且选自聚乙烯、聚丙烯、聚甲基戊烯、环状烯烃聚合物、环状烯烃共聚物、聚氯乙烯、聚氨酯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚酯、聚酰胺、离聚物、乙烯－乙酸乙烯酯共聚物、乙烯－乙烯醇共聚物、乙烯－丙烯酸共聚物、乙烯－丙烯酸甲酯共聚物、乙烯－甲基丙烯酸共聚物、乙烯－甲基丙烯酸甲酯共聚物等中、并且进行了辐射处理或亲水化处理的基材形成培养容器的培养面的至少一部分，在培养容器中收容含有作为细胞粘附因子的层粘连蛋白或其片段的培养基和细胞，培养贴壁细胞，由此能够不向培养容器涂布层粘连蛋白地合适地培养贴壁细胞。

技术领域

本发明涉及细胞的培养技术，特别涉及使细胞粘附于培养容器而进行培养的细胞培养方法以及细胞培养系统。

背景技术

近年来，在医药品的生产、基因治疗、再生医疗、免疫疗法等领域中，要求在人工环境下高效地大量培养细胞或组织、微生物等。

在此种状况下，实行向培养容器注入细胞和培养基、并培养细胞的做法。

通常，在培养容器中对多能干细胞(iPS细胞等)、胚胎干细胞(ES细胞)进行粘附培养的情况下，需要向培养容器的培养面涂布层粘连蛋白等细胞粘附因子的前处理(参照专利文献1)。具体而言，例如将层粘连蛋白溶液加入培养容器，在37℃静置1小时以上而进行层粘连蛋白的涂布后，从培养容器除去层粘连蛋白溶液，将细胞和培养基加入培养容器，进行细胞的粘附培养。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2015－178526号公报

发明内容

发明所要解决的问题

然而，为了像这样对细胞进行粘附培养，必须向培养容器涂布层粘连蛋白，存在有操作烦杂的问题。另外，在供给已涂布层粘连蛋白的培养容器的情况下，存在有其制造、品质管理辛苦的问题。

因而，本发明人等对于是否可以如下所示地培养进行了研究，即，不向培养容器涂布层粘连蛋白，而是使层粘连蛋白混合于培养基中而进行培养，由此使细胞粘附于培养容器而培养。

其结果是，在使用了由疏水性材料形成的培养容器的情况下，即使使层粘连蛋白混合于培养基中而进行培养，也无法使细胞粘附于培养容器而培养。对于其理由可以如下所示地推测。

如图1所示，在培养基中含有各种各样的蛋白质，培养容器的培养面成为由白蛋白等蛋白质覆盖的状态。此时，在培养面由亲水性材料形成的情况下，可以认为，因层粘连蛋白与白蛋白等在培养面发生交换吸附，而将层粘连蛋白涂布于培养面。另一方面，在培养面由疏水性材料形成的情况下，可以认为，由于白蛋白等与培养面疏水结合，因此无法与层粘连蛋白交换吸附，无法将层粘连蛋白涂布于培养面。

此处，专利文献1中记载的发明中，虽然向培养容器涂布层粘连蛋白，然而对于使用添加有层粘连蛋白的培养基培养细胞的情况也有记载。

然而，对于用于实现它的具体构成没有给出，对于使用何种特性的培养容器才可以使用添加有层粘连蛋白的培养基培养细胞没有研究。

本发明是鉴于上述情况而完成的，其目的在于，提供能够在不向培养容器涂布层粘连蛋白的情况下合适地培养贴壁细胞的细胞培养方法及细胞培养系统。

用于解决问题的方法