[发明专利]一种诱导胚胎干细胞分化形成子宫内膜腺上皮前体细胞的方法和培养基有效
| 申请号： | 201880010424.2 | 申请日： | 2018-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN111642131B | 公开（公告）日： | 2021-11-19 |
| 发明（设计）人： | 江秀秀 | 申请（专利权）人： | 浙江大学医学院附属妇产科医院 |
| 主分类号： | C12N5/0735 | 分类号： | C12N5/0735;C12N5/071;A61K35/48;A61P15/00 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310006*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 诱导 胚胎 干细胞 分化 形成 子宫 内膜 上皮 体细胞 方法 培养基 | ||
1.一种诱导人胚胎干细胞分化形成子宫内膜腺上皮前体细胞的方法，其特征在于，其包括以下步骤：
上皮细胞分化步骤：将由人胚胎干细胞诱导分化形成的内胚层细胞置于上皮细胞分化培养基中以诱导分化形成上皮细胞；
子宫内膜腺上皮前体细胞分化步骤：将得到的所述上皮细胞置于子宫内膜腺上皮前体细胞分化培养基中培养以诱导分化形成子宫内膜腺上皮前体细胞；
其中，上皮细胞分化培养基含有如下组分：基础培养基DMEM/F12、EGF、FBS以及GlutaMAX；
子宫内膜腺上皮前体细胞分化培养基含有如下组分：基础培养基DMEM/F12、EGF、FBS、GlutaMAX以及WNT3A，
其中所述人胚胎干细胞是未经过体内发育的受精14天以内的人类胚胎分离或者获取的干细胞，
所述内胚层细胞为CD324和CD184表达呈阳性的内胚层细胞，
所述上皮细胞为SOX17表达呈阳性的上皮细胞，
其中，在所述子宫内膜腺上皮前体细胞分化培养基中，EGF的浓度为5-15ng/ml，FBS的含量为5％-15％，GlutaMAX的浓度为1-3mM，WNT3A的浓度为150-250ng/ml；以及
其中，所述上皮细胞分化培养基中，EGF浓度为5-15ng/ml，FBS含量为5％-15％，GlutaMAX的浓度为1-3mM。
2.一种子宫内膜腺上皮前体细胞分化培养基，其特征在于，该培养基由如下组分组成：基础培养基DMEM/F12、EGF、FBS、GlutaMAX以及WNT3A；
EGF的浓度为5-15ng/ml，FBS的含量为5％-15％，GlutaMAX的浓度为1-3mM以及WNT3A的浓度为150-250ng/ml。
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