[实用新型]易换液贴壁细胞培养皿

说明书

本实用新型公开了一种易换液贴壁细胞培养皿，所述的皿体为双层结构，其中上层为细胞培养层，下层为培养基缓冲层，皿体上设有加液孔直接联通培养基缓冲层，在细胞培养层上还设有半透膜区域。通过加液孔吸取下层培养基时，上层的培养基会通过环形槽进入下层被吸取；而漂洗细胞时可以将缓冲液通过加液孔加入下层，缓冲液可以通过环形槽缓慢渗入上层，等覆盖上层后再通过加液孔吸取走；在整个换液过程中换液的仪器都不直接接触细胞表面，造成细胞污染，也不会产生局部高液压对细胞造成冲击。

技术领域

本实用新型涉及一种培养皿，特别涉及一种用于贴壁细胞的培养皿。

背景技术

细胞培养是很多生物实验室，生物科技或医疗公司广泛使用的技术。细胞根据其生长状态可以主要分成悬浮细胞和贴壁细胞，前者主要悬浮在培养基中，而后者在生长过程中更倾向于附着在培养器皿的表面。细胞在培养过程中为了保持良好的营养状态，需要定时更换培养基，对于贴壁细胞通过吸走上清，对细胞用缓冲液进行漂洗，再更换新的培养基即可。但对于有些贴壁细胞来说，尤其是一些贴壁能力较弱的细胞,例如HEK293，在这个过程中，容易产生如下的技术问题：

1）在吸取培养基时,一般通移液枪或电动移液器来操作，细胞容易跟上清一起被吸走；

2）通移液枪或电动移液器来进行的细胞漂洗过程中，会对细胞造成冲击；

添加培养基的过程中也有可能局部压力过大造成对细胞的伤害。

发明内容

本实用新型的发明目的是为了克服上述背景技术的缺点，提供一种细胞培养皿设计，用来培养贴壁细胞，为细胞换液提供缓冲空间，减少该操作对细胞的伤害。

本实用新型的技术方案是：一种易换液贴壁细胞培养皿，其特征是所述的皿体为双层结构，其中上层为细胞培养层，下层为培养基缓冲层，皿体上设有加液孔直接联通培养基缓冲层，在细胞培养层上还设有半透膜区域。

本实用新型的有益效果是：使用本结构的培养皿，细胞培养的表面积不受影响，但细胞换液的操作更为简单。通过加液孔吸取下层培养基时，上层的培养基会通过环形槽进入下层被吸取；而漂洗细胞时可以将缓冲液通过加液孔加入下层，缓冲液可以通过环形槽缓慢渗入上层，等覆盖上层后再通过加液孔吸取走；在整个换液过程中换液的仪器都不直接接触细胞表面，造成细胞污染，也不会产生局部高液压对细胞造成冲击。

附图说明

如图1为实施例俯视图；

图2为本实施例的剖面图；

其中：1、皿体，2、细胞培养层，3、培养基缓冲层，4、加液孔，5、半透膜区域。

具体实施方式

如图1及图2所示的本实施例，皿体（1）的上层为细胞培养层（2），皿体的下层为培养基缓冲层（3），皿体上设有加液孔（4）直接联通培养基缓冲层，在细胞培养层上还设有半透膜区域（5）。

所述的加液孔孔高与皿体高度一致，以确保大部分培养基都保留在细胞培养层。

所述的细胞培养层与培养基缓冲层之间的间隔距离为0.1～0.2毫米，上下层间隔距离较小，这样可以尽量减少培养基的浪费。

所述的半透膜区域为环形槽，且在环形槽上设有半透膜，该半透膜的覆膜孔径为0.5～1微米，保证液体可以通过该半透膜，而细胞无法通过，例如HEK293细胞直径约为10微米。

使用本实用新型为贴壁细胞换液的步骤如下：

1）开始细胞培养的过程类似一般的培养皿操作，即细胞计数后，取用适宜细胞数加在上层细胞培养层，因为半透膜不透细胞，所以细胞会一直在上层，为了防止培养基全渗入下层的培养基缓冲层，需要快速通过加液孔加培养基，等培养基渗入上层并达到合适高度，约1～2毫米时停止。