[实用新型]一种免疫共沉淀试剂盒

说明书

本实用新型涉及一种免疫共沉淀试剂盒，包括盒盖、海绵垫和盒体，所述盒体设有容纳腔，所述海绵垫置于所述容纳腔内；所述海绵垫设有容器孔，所述容器孔内分别设有第一试剂瓶、第二试剂瓶和EP管；所述第一试剂瓶包括PBS试剂瓶、Wash Buffer I试剂瓶和Wash BufferⅡ试剂瓶；所述第二试剂瓶包括Cell lysis buffer试剂瓶；所述EP管包括Protease Inhibitor EP管、Protein A/G‑agarose beads EP管、IgG EP管、Cross‑linking agent(50mM)EP管和Elution buffer EP管；使用本实用新型，能够方便的进行免疫共沉淀试验，免除抗体信号干扰。

技术领域

本实用新型涉及生物技术领域，具体涉及一种不存在抗体信号干扰目的蛋白信号的免疫共沉淀试剂盒。

背景技术

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是基于抗体和抗原之间结合的专一性用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定蛋白质是否在生理条件下有相互作用的有效方法。

然而，传统的由于免疫沉淀实验使用目的蛋白抗体加Protein A/G-琼脂糖珠/磁珠与样品孵育，因此在最后离心获得抗体-琼脂糖珠/磁珠复合物后，离心管中主要含有抗体、目的蛋白、Protein A/G-琼脂糖珠/磁珠以及一些其它非特异性作用蛋白。其中，抗体和目的蛋白以及Protein A/G-琼脂糖珠/磁珠三者之间是以非共价健结合在一起，只有Protein A/G与琼脂糖珠/磁珠是共价结合在一起的。因此，最后经过添加含巯基乙醇的加样缓冲液以及煮沸变性并离心出去 Protein A/G-琼脂糖珠/磁珠后，离心管含有抗体和目的蛋白以及少量非特异性吸附蛋白。这样SDS-PAGE中就至少含有目的蛋白和抗体二种蛋白，由于加样缓冲液中含有巯基乙醇和高温从而导致抗体的重链与轻链之间的二硫键被破坏从而使得抗体分子变成重链分子(55KD)和轻链分子(25KD)。因此，WB显色反应中除了能检测到目的蛋白外，如果所使用的二抗与用于免疫沉淀实验的抗体分子属于同一种属的话，还能检测到重链和轻链分子。通常用于免疫沉淀的抗体量非常大(1ug)，所以当目的蛋白的大小接近重链或者轻链分子时，重链或者轻链分子的WB信号常常由于信号过强而导致影响对目的蛋白的WB结果的判断。

由此可见，传统的Co-IP方法存在抗体信号干扰目的蛋白信号的缺点，虽然可以通过选择不同种属的抗体分别进行免疫沉淀实验和WB实验，然后再选择一个种属交叉反应比较弱或者无种属交叉反应的二抗进行WB实验，减弱重链和轻链分子的WB信号，但会大大增加实验成本和实验设计复杂性。

实用新型内容

为了解决现有技术存在的问题，本实用新型提供了一种免疫共沉淀试剂盒；包括盒盖、海绵垫和盒体，海绵垫设有试剂瓶和EP管，所述试剂瓶和EP管分别装有PBS、WashBuffer I、Wash BufferⅡ、Cell lysis buffer、Protease Inhibitor、 Protein A/G-agarose beads、IgG、Cross-linking agent和Elution buffer，使用本实用新型，能够方便的进行免疫共沉淀试验，免除抗体信号干扰。

本实用新型的目的是提供一种排除抗体信号干扰目的蛋白信号的免疫共沉淀试剂盒，包括盒盖、海绵垫和盒体，所述盒体设有容纳腔，所述海绵垫置于所述容纳腔内；所述海绵垫设有容器孔，所述容器孔内分别设有第一试剂瓶、第二试剂瓶和EP管；所述第一试剂瓶包括PBS试剂瓶、Wash Buffer I试剂瓶和Wash BufferⅡ试剂瓶；所述第二试剂瓶包括Cell lysis buffer试剂瓶；所述EP 管包括Protease Inhibitor EP管、Protein A/G-agarose beads EP管、IgG EP管、 Cross-linking agent EP管和Elution buffer EP管。