[实用新型]一种抗缪勒管激素免疫层析定量检测试纸条

说明书

本实用新型公开了一种抗缪勒管激素免疫层析定量检测试纸条，包括PVC底板、样品垫、荧光标记物结合垫、硝酸纤维素和吸水垫；所述试纸条由样品垫、荧光标记物结合垫、硝酸纤维素、吸水垫依次搭接粘贴在PVC底板上构成。所述荧光标记物结合垫上固定有生物素标记的抗缪勒管激素单克隆抗体和链霉亲和素标记的荧光蛋白；所述硝酸纤维膜上有检测线和质控线，检测线包被抗缪勒管激素单克隆抗体，其与上述生物素标记的抗缪勒管激素单克隆抗体具有不同的识别表位。本实用新型与目前常见的检测抗缪勒管激素的方法相比，如：化学发光法/酶联免疫吸附法，不仅大大缩短了检测时间，同时还提高了检测灵敏度。

技术领域

本实用新型属于免疫检测领域，具体涉及一种高灵敏度抗缪勒管激素免疫层析定量检测试纸条。

背景技术

抗缪勒管激素(Anti-Mullerian hormone，AMH)是由两个相同的70kD亚基组成的二聚糖蛋白，相对分子质量为140kD，属蛋白质激素转化生长因子B(TGF－β)超家族成员之一。抗缪勒管激素在性腺器官发育过程中起重要作用，在男性中，AMH主要由睾丸间质细胞生成，在胚胎发育期间，其生理功能是抑制雄性缪勒管的发育，参与睾丸的分化和发育。在女性中，AMH由卵泡颗粒细胞生成，在女性生殖系统发育过程中，AMH抑制卵巢颗粒细胞上黄体生成素受体及黄体酮的生物合成和调节卵子的发生及细胞的减数分裂，女性随着年龄增加，卵巢功能下降，血清AMH水平也逐渐下降。

研究发现，抗缪勒管激素参与女性卵巢功能调节，调控卵泡生长与发育，AMH水平与卵巢储备功能呈正相关性，因此AMH可以作为女性卵巢功能评价的标志物。传统的卵巢功能评估主要以滤泡刺激激素(FSH)、抑制素B(INHB)、雌激素(E2)、年龄及窦卵泡数目(AFC)等作为指标，单一指标无法真实反映卵巢状况。AMH作为一种新型的评估女性卵巢功能的指标，相较于传统方法，具有以下优点：(1)随着年龄增长或卵巢功能开始衰退，早于FSH、INHB、E2出现变化，更早更灵敏体现卵巢功能变化；(2)不受垂体促激素与经期的影响，整个经期周期数值变化不大；(3)可用于预测体外受精联合胚胎移植术(IVF)的卵巢反应性、预防卵巢过度刺激综合症(OHSS)、多囊卵巢综合征(PCOS)的诊断。

目前国内外临床上检测AMH的常用方法有酶联免疫吸附法(ELISA)、电化学发光法和化学发光法。其中ELISA方法耗时长、灵敏度低、背景值高、易造成假阳性和假阴性结果，并且需要专业人员进行操作。电化学发光法和化学发光法如罗氏的ELECSYS AMH检测仪目前逐渐替换ELISA法，但价格昂贵，不适合单人份和小批量检测用，加上需要专门的仪器使用人员，维修和检测成本均较高，不适合大范围推广使用。目前国内检测AMH的产品较少，产品性能存在差异，因此，临床上迫切需要建立一种快速、便捷、准确的AMH检测产品。

生物素-亲和素系统(biotinavidin system,BAS)，是一种医学领域广泛应用的生物反应放大系统。大量研究表明，BAS几乎可与目前研究成功的各种标记物结合。将该系统应用于免疫组化，酶联免疫，荧光免疫，放射免疫等检测技术中，可显著地提高以上技术方法的敏感性、特异性和稳定性，有助于临床快速诊断，并利于进行大规模流行病学调查，成为研究免疫反应的有力工具。由于BAS检测系统经济快速，又无放射物质污染，不需复杂仪器，具有巨大潜力和应用的可能性。

生物素-亲和素系统检测原理：生物素经化学修饰后可成为带有多种活性基团的衍生物--活化生物素，活化生物素可以在蛋白质交联剂的介导下，与已知的几乎所有生物大分子偶联，包括蛋白质，核酸，多糖，脂类等。亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白，对生物素有非常高的亲和力，亲和常数(K)为10mol/L，两者结合稳定性好专一性强。这样，结合了荧光物质的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应，起到了多级放大作用，通过对荧光物质的激发而发射特定荧光信号，达到检测未知抗原(或抗体)分子的目的。链霉亲和素是与亲和素有相似生物学特性的一种蛋白质，链霉亲和素与亲和素一样分子中每条肽链都能结合一个生物素，因几乎所有用于标记的物质均可以同亲和素或链霉亲合素结合。利用生物素-亲和素系统研制抗缪勒管激素检测试快速诊断试剂尚无报道。