[发明专利]一种基于血尿中代谢产物预测甘地胶囊治疗糖尿病肾病机制的新方法

说明书

本发明提供了一种基于血尿中代谢产物预测甘地胶囊治疗糖尿病肾病机制的方法，其特征在于,具体步骤如下所示:S1、1:1的选取试验组和对照组；S2、定期收集待测样本；S3、处理S2所述的样本，进行UPLC‑Q‑TOF/MS分离分析；S4、对S3获得的UPLC‑Q‑TOF/MS图谱数据进行代谢轮廓分析，获得数据集；S5、根据S4获得的数据集构建PLS‑DA模型；S6、根据S5构件的模型的S‑PLOT载荷图和VIP分值，筛选出能够区分空白组和甘地胶囊给药组的代谢标志物；S7、采用IPA分析方法对S6筛选得到的代谢标志物进行富集分析，将各代谢标志物根据富集效率进行排序。通过该方法能够预测甘地胶囊治疗糖尿病肾病的药理机制。

技术领域

本发明涉及代谢组学领域，特别涉及一种基于血/尿中代谢产物预测甘地胶囊治疗糖尿病肾病机制的方法。

背景技术

代谢组学是系统生物学研究领域的一个重要分支，其通过对病理生理因素或基因修饰造成的生物化学变化及代谢轮廓分析，为复杂机制的阐释提供海量信息，这与中药复方制剂成分多、药理机制繁杂的特点不谋而合，因此可用于中药复方制剂药理学研究。目前，代谢组学研究方法已广泛应用于各类代谢性疾病的病理机制和药物作用机制的研究。核磁共振(NMR)、气相色谱质谱联用(GC-MS)和液相色谱质谱联用(LC-MS)技术是三种常用于代谢组学分析的现代分析技术。

糖尿病肾病患者微血管病变的发生率较高，血压是肾功能损害的独立危险因素，若高血压患者同时患有糖尿病，其糖尿病肾病发生率将显著提高，临床表现为持续性蛋白尿，患者将进入肾衰竭阶段，死亡率会显著增加。目前，市场上针对糖尿病肾病治疗的中西药非常少。院内制剂甘地胶囊经过多年的临床验证，具有显著降低蛋白尿的作用，在院内长期用于糖尿病肾病等微血管病变的治疗。前期临床试验数据表明，甘地胶囊可以显著减少糖尿病肾病患者的24h尿微量白蛋白排泄，延缓糖尿病肾病的进展，保护和改善肾脏功能，从而提高患者的生命质量，且患者在服用甘地胶囊2个疗程(4个月)后有明显改善。然而，甘地胶囊治疗糖尿病肾病的分子机制仍然不甚清楚。故而，一种能够明确该药物作用机制的方法急待研究。

发明内容

本发明旨在克服上述缺陷，提供一种能够明确甘地胶囊治疗糖尿病肾病患者的机制。

本发明提供的一种基于血/尿中代谢产物预测甘地胶囊治疗糖尿病肾病机制的方法，其特征在于,具体步骤如下所示:

S1、1:1的选取试验组和对照组；

该试验组指服用甘地胶囊的病患；

该对照组指未服用甘地胶囊的病患。

S2、定期收集待测样本；

两组的病患均采用同样的检测周期进行样本的收集。

S3、处理S2上述的样本，进行UPLC-Q-TOF/MS分离分析；

S4、对S3获得的UPLC-Q-TOF/MS图谱数据进行代谢轮廓分析，获得数据集；

该代谢轮廓分析指在特定代谢过程中对结构相似或性质相关的预设代谢物采用针对性的分析技术进行定量测定，如：某一类结构相似、性质相关的化合物等。

S5、根据S4获得的数据集构建OPLS-DA模型(采用使用分析软件SIMCA-P11.0(Umetrics AB,Umea,Sweden)等方式)构建偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)模型；

S6、根据S5构建的模型中S-PLOT载荷图和计算VIP分值，同时获得相应的P值，以VIP值大于1.0且P值小于0.05为条件，筛选出能够区分空白组和甘地胶囊给药组的代谢标志物。该步骤可采用分析软件SIMCA-P11.0(Umetrics AB,Umea,Sweden)来实现。

S7、采用IPA分析方法对S6筛选得到的代谢标志物进行富集分析，将各代谢标志物根据富集效率进行排序。