[发明专利]一种三维细胞培养方法在审
| 申请号： | 201811643544.4 | 申请日： | 2018-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN109628370A | 公开（公告）日： | 2019-04-16 |
| 发明（设计）人： | 余俊潮;李杰 | 申请（专利权）人： | 深圳光彩生命工程技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/00 | 分类号： | C12N5/00 |
| 代理公司： | 深圳市钧含知识产权代理有限公司 44290 | 代理人： | 符立新 |
| 地址： | 518101 广东省深圳市宝*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 生物反应器 细胞组织 培养盘 细胞培养基 细胞 三维 振荡 细胞培养 三维细胞培养 转动 培养液 无血清培养基 速度提升 细胞繁殖 细胞聚集 转铁蛋白 硒酸钠 胰岛素 置入 交换 | ||
1.一种三维细胞培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
将细胞置入细胞培养基中，将载有细胞的细胞培养基加入至三维细胞组织生物反应器内的培养盘上，除去培养液上的气泡；启动三维细胞组织生物反应器，三维细胞组织生物反应器带动其培养盘进行振荡和转动；其中，所述培养盘的振荡角度为4-12度，转速为5-30rpm。
2.根据权利要求1所述一种三维细胞培养方法，其特征在于，所述培养盘的振荡角度为8度。
3.根据权利要求1所述一种三维细胞培养方法，其特征在于，所述培养盘的转速随细胞培养时间的延长而增加。
4.根据权利要求3所述一种三维细胞培养方法，其特征在于，在细胞培养的第1-5天，所述培养盘转速为8rpm；在细胞培养的第6-10天，所述培养盘转速为12rpm；在细胞培养的第10天以后，所述转速为14rpm。
5.根据权利要求1所述一种三维细胞培养方法，其特征在于，所述三维细胞组织生物反应器对应所述培养盘的背侧均设置有由硅胶制成的换气膜。
6.根据权利要求1至5任一项所述一种三维细胞培养方法，其特征在于，所述细胞培养基为含转铁蛋白、胰岛素、硒酸钠、SCF、IL-3、IL-6和TPO的stemspan无血清培养基。
7.根据权利要求6所述一种三维细胞培养方法，其特征在于，于细胞培养的第4天向细胞培养基中补充原培养基的1/3体积的培养基。
8.根据权利要求7所述一种三维细胞培养方法，其特征在于，除去培养液上的气泡时，向所述三维细胞组织生物反应器内的培养盘上输出氧气气流；对应每一次补充培养基，均进行一次氧气气流输入。
9.根据权利要求8所述一种三维细胞培养方法，其特征在于，氧气的气流速度为0.1-1m/s。
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