[发明专利]一种脂肪酶检测试剂盒及生产工艺

说明书

本发明的一种脂肪酶检测试剂盒包括彼此独立的试剂R1和试剂R2，试剂R1包括如下成分：试剂R2包括如下成分：该脂肪酶检测试剂盒即开即用，无需配制，并且长期存放的稳定性较好。本发明还提出一种脂肪酶检测试剂盒的生产工艺。

技术领域

本发明涉及一种脂肪酶检测试剂盒，属于诊断试剂盒技术领域。

背景技术

脂肪酶(Lipase,LPS)是一组特异性较低的脂肪水解酶类，主要来源于胰腺，其次为胃及小肠，能水解多种含长链脂肪酸的甘油酯。通常胰腺以等量分泌脂肪酶及共脂肪酶进入循环，但因共脂肪酶相对分子量较小，可以从肾小球滤出，急性胰腺炎时，共脂肪酶/脂肪酶比例下降。

血清LPS活性的测定是急性胰腺炎诊断的重要指标。急性胰腺炎时，血清淀粉酶增加的时间较短，而血清LPS活性上升可持续10-15天。另外，慢性胰腺炎、结石致胰腺管阻塞、肝脏疾病、手术或慢性肾脏病都会导致脂肪酶活性的增高。目前临床上常用的测定方法有滴定法、电极法、比浊法、分光光度计法及荧光光度计法。

现有的几种技术中对于血清LPS活性的测定需要比较复杂的配液过程，并且存放时间受环境条件影响较大，长期存放的稳定性差。

发明内容

为克服现有技术的不足，本发明提出一种脂肪酶检测试剂盒，其能即开即用，无需配制，并且长期存放的稳定性较好。

为实现上述目的，本发明的一种脂肪酶检测试剂盒包括彼此独立的试剂R1和试剂R2，其中：

试剂R1包括如下成分：

试剂R2包括如下成分：

进一步地，试剂R1包括如下成分：

试剂R2包括如下成分：

进一步地，在试剂R1中，表面活性剂包括聚氧乙烯硬化蓖麻油、烯烃马来酐聚合物，聚氧乙烯硬化蓖麻油、烯烃马来酐聚合物的质量比为1:1。

进一步地，在试剂R2中，蛋白质变性剂采用脲。

进一步地，在试剂R1中，酶反应加速剂包括氯化钠、氯化钙，氯化钠的含量为1.2g/L，氯化钙的含量为1.110g/L，在试剂R2中，酶反应加速剂包括氯化钙。

进一步地，试剂R1中缓冲液采用N,N-二羟乙基甘氨酸缓冲液。

进一步地，试剂R2中的缓冲液采用酒石酸钾钠缓冲液。

进一步地，试剂R1与试剂R2的体积比为2:1。

本发明检验血清脂肪酶的原理是：1,2-邻-二月桂基-消旋-甘油-3-戊二酸(6’-甲基试卤灵)酯在脂肪酶的作用下水解生成1,2-邻-二月桂基-消旋-甘油和戊二酸(6’-甲基试卤灵)酯。其中戊二酸(6’-甲基试卤灵)酯在脂肪酶的进一步作用下水解生成戊二酸和甲基试卤灵，甲基试卤灵在溶液中呈现出红色。在波长570nm处检测红色的甲基试卤灵生成速率，该生成速率和样本中的脂肪酶活性成正比，通过计算得出样品中的脂肪酶活性。

N,N-二羟乙基甘氨酸缓冲液、酒石酸钾钠缓冲液是性质稳定的生物缓冲剂，为酶促反应提供稳定的、适宜的PH环境。当试剂储存时，为试剂提供一个良好的储存环境，保证试剂的有效储存，有助于延长试剂的存放期限。

氯化钙、氯化钠是本发明中的酶反应加速剂，可以激活酶的活性，并且提供反应所需的离子环境，同时能够增加试剂中盐离子效应。此外，Ca²⁺是脂肪酶的活化剂，可增加脂肪酶的活性。