[发明专利]一种卵黄抗体的脱脂方法在审
申请号: | 201811631680.1 | 申请日: | 2018-12-28 |
公开(公告)号: | CN111378031A | 公开(公告)日: | 2020-07-07 |
发明(设计)人: | 王耀;刘文进 | 申请(专利权)人: | 埃格生物科技(常州)有限公司 |
主分类号: | C07K16/02 | 分类号: | C07K16/02 |
代理公司: | 南京勤行知识产权代理事务所(普通合伙) 32397 | 代理人: | 吕波 |
地址: | 213200 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 卵黄 抗体 脱脂 方法 | ||
1.一种卵黄抗体的脱脂方法,其特征在于:具体步骤如下:
第一步:强化免疫,用临床诊断指标免疫原,按照特定程序免疫鸡,鸡所产鸡蛋蓄积特定卵黄抗体;
第二步:效价检测,对鸡蛋卵黄抗体效价检测,收集合格所产鸡蛋卵黄;
第三步:酸化,鸡蛋卵黄用纯化水稀释、酸化,脱除大部分脂质;
第四步:脱脂,用脱脂技术彻底去除残留脂质。
2.按照权利要求1所述的一种卵黄抗体的脱脂方法,其特征在于:所述第一步免疫鸡的强化方法为:每间隔7~20天进行强化免疫,按照抗原与佐剂等体积混合,多点注射鸡胸肌或翼下肌肉0.5~1.5 ml,每次抗原剂量为10~1000 ug/只。
3.按照权利要求2所述的一种卵黄抗体的脱脂方法,其特征在于:所述第一步中所述佐剂为弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂、天然来源佐剂、油乳佐剂、细胞因子佐剂、微生物佐剂、核酸佐剂、纳米佐剂等。
4.按照权利要求1所述的一种卵黄抗体的脱脂方法,其特征在于:所述第二步鸡蛋卵黄抗体效价检测方法为:鸡蛋卵黄液用0.85%生理盐水作梯度稀释,在鸡蛋卵黄检测效价超过1:64,收集所产鸡蛋,分离鸡蛋卵黄。
5.按照权利要求4所述的一种卵黄抗体的脱脂方法,其特征在于:所述第二步中梯度稀释为1:2,1:4,1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256。
6.按照权利要求1所述的一种卵黄抗体的脱脂方法,其特征在于:所述第三步鸡蛋卵黄稀释与酸化方法为:鸡蛋卵黄与纯化水为1:5~1:9进行稀释,调节pH至4.5~5.5进行酸化,充分搅拌混合均匀,4℃静置过夜,分离上清液,取上清液即为酸化卵黄液。
7.按照权利要求1所述的一种卵黄抗体的脱脂方法,其特征在于:所述第四步脱脂技术为:酸化卵黄液加入质量浓度为1~20 g/L的气相二氧化硅混匀后,离心收集上清液,取上清液即为完全脱脂卵黄抗体液。
8.按照权利要求6或7所述的一种卵黄抗体的脱脂方法,其特征在于:所述第三步或第四步中离心条件为在2~8℃,10000 g,30分钟。
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