[发明专利]一种生物降酚菌剂及其应用方法

权利要求书

1.一种生物降酚菌剂，其特征在于：由两株菌的菌粉组成，分别为产碱菌(Alcaligenesspp)，菌株代码为YJY18-10，其保藏号为CGMCC NO.16158；蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)，菌株代码为YJY18-09；其保藏号为CGMCC NO.16157。

2.根据权利要求1所述的生物降酚菌剂，其特征在于：所述菌粉的菌量为单菌9×10⁹-5×10¹⁰个/g。

3.根据权利要求1所述的生物降酚菌剂，其特征在于：所述菌粉由产碱菌菌粉和蜡样芽孢杆菌菌粉按照1-3:1的重量比复配，活化后使用。

4.一种生物降酚菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下操作步骤：

(1)发酵培养：将产碱菌、蜡样芽孢杆菌分别接种于灭菌后发酵培养基中发酵培养获得各自的菌液；在温度为28-30℃的条件下，发酵罐培养至溶氧上升，pH下降；

(2)制备菌粉：将发酵液离心后，添加辅料混匀，烘干后即得到固体菌粉。

5.根据权利要求4所述的高效生物降酚菌剂的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

1)菌种活化：在无菌操作台上，取1～5μL冻存的产碱菌和蜡样芽孢杆菌于含有LB液体培养基的试管内，28-32℃，130-180rpm培养18-24h；

2)种子制备：在无菌操作台上，将活化的菌种转入含有灭菌液体LB培养基的三角瓶内，每三角瓶内分装200mL该培养基，一支活化的试管菌种接种一个三角瓶，然后28-32℃，130-180rpm培养18-24h；

3)接种发酵罐：首先将发酵罐罐体、管线、空气过滤器进行空消，121℃，空消30min，待温度降低后，注入培养基，然后对培养基进行实消，121℃，实消30min；待温度降至28-32℃时进行接种；

4)发酵条件：接种量v/v 5-10％；培养温度28-32℃；pH：6.8-7.0；初始转速：200rpm；发酵罐压：0.05Mpa；通气量比：1:1；发酵周期：16-24h；

5)菌粉制备：发酵结束后，添加硅藻土、玉米淀粉吸附菌体，之后烘干、粉碎即可得到相应菌粉。

6.根据权利要求5所述生物降酚菌剂的制备方法，其特征在于：所述的用于菌株分离的培养基为LB培养基，培养基配方为：蛋白胨10g/L，NaCl 10g/L，酵母浸粉5g/L，pH 7.0-7.2，溶剂为水。

7.根据权利要求5所述的生物降酚菌剂的制备方法，其特征在于，用于培养两种菌种的培养基中，针对产碱菌的发酵培养基组成为：

按重量份计为：1.0～1.5份蛋白胨，0.5-1份酵母提取物，1～1.5份氯化钠，96～97.5份软化水；

针对蜡样芽孢杆菌的发酵培养基组成为：按重量份计为：1-1.5份葡萄糖，1-1.5份豆粕，0.2-0.3分硝酸铵，0.01-0.03份硫酸锰，0.03-0.07份硫酸镁，0.02-0.05份氯化钠，0.02-0.05份氯化钙，0.003-0.005份硫酸亚铁，96.5-97.7份软化水。

8.权利要求1所述生物降酚菌剂的使用方法，其特征在于：使用条件为废水pH 6.0-7.0，温度25-35℃，含酚废水中进水酚的含量低于3000mg/L。