[发明专利]消旋卡多曲中对甲苯磺酸酯类物质的检测方法

说明书

本发明公开了一种消旋卡多曲中对甲苯磺酸酯类物质的检测方法。该方法以德国默克LiChrospher RP 18为色谱柱，采用HPLC检测方法对消旋卡多曲中的对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯和对甲苯磺酸异丙酯进行定性和定量分析。本发明进行了方法学验证，经实验证明，该方法具有专属性强、快速、灵敏、准确等优点。本发明首次建立了消旋卡多曲中基因毒性杂质对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯和对甲苯磺酸异丙酯的定性和定量方法，便于对消旋卡多曲的质量进行控制，从而提高了消旋卡多曲的用药安全性。

技术领域

本发明涉及一种消旋卡多曲中基因毒性杂质的检测方法，具体涉及对甲苯磺酸酯类物质(对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯和对甲苯磺酸异丙酯)的HPLC检测方法，属于医药技术领域。

背景技术

消旋卡多曲是由法国Bioprojet公司研制的一种脑啡肽酶抑制剂，并于1993年法国以商品名Tiorfan上市。消旋卡多曲作为一种新型作用机制的抗腹泻药，直接抑制肠道过度分泌，快速改善腹泻症状，治疗小儿轮状病毒性腹泻疗效显著，能明显缩短病程、减少患儿的痛苦，适用于成人及1月以上婴儿和儿童的急性腹泻。上市不久，加拿大儿科协会和美国疾病预防中心就把消旋卡多曲列入儿童腹泻治疗的必备药物，2011年也列入了中国国家儿科腹泻病治疗共识的推荐用药。目前国内临床一线的儿科医生已经将消旋卡多曲作为临床儿童腹泻治疗的高效安全药物，具有广阔的市场前景。

对甲苯磺酸是消旋卡多曲合成中的副产物，可能会和溶剂中的甲醇、乙醇、异丙醇反应生成对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯和对甲苯磺酸异丙酯。磺酸酯类为基因毒性杂质，必须严格控制。经检索，目前关于对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯和对甲苯磺酸异丙酯的痕量检测多采用GC-MS的方法。

对甲苯磺酸甲酯，英文名称：Methyl p-toluenesulfonate，CAS：80-48-8，分子式：C₈H₁₀O₃S；分子量：186.22，结构式如下所示：

对甲苯磺酸乙酯：英文名称：Ethyl p-toluenesulfonate，CAS：80-40-0，分子式：C₉H₁₂O₃S；分子量：200.25，结构式如下所示：

对甲苯磺酸异丙酯：英文名称：Isopropyl p-toluenesulfonate，CAS：2307-69-9，分子式：C₁₀H₁₄O₃S；分子量：214.28，结构式如下所示：

发明内容

本发明的目的在于克服GC-MS仪器昂贵、普及率不高、操作复杂等不足，提供一种更简单易行且同时检测三种对甲苯磺酸酯类的HPLC方法。经实验证明，该方法具有专属性强、快速、灵敏、准确等优点，能够可靠地对消旋卡多曲中对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯和对甲苯磺酸异丙酯进行定性定量分析。

本发明的技术方案是：一种同时检测消旋卡多曲中三种对甲苯磺酸酯类物质(对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯和对甲苯磺酸异丙酯)含量的HPLC方法，其特征是，将消旋卡多曲样品溶解后采用HPLC检测方法对其中的对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯和对甲苯磺酸异丙酯进行定性、定量分析。

其中，色谱条件为：色谱柱：德国默克LiChrospher RP 18；流动相A：1.0±0.2g/l的磷酸二氢钾水溶液，磷酸调pH至2.5；流动相B：乙腈；检测波长：225nm。

优选色谱条件为：

色谱柱：德国默克LiChrospher RP 18(end-capped,250mm×4.0mm×5μm)；

流动相A：1.0g磷酸二氢钾置1000ml水中，磷酸调pH至2.5；