[发明专利]一种快速检测尿液对羟基苯丙氨酸的检测试剂及其制备方法

说明书

一种快速检测尿液对羟基苯丙氨酸的检测试剂，由显色剂、缓冲试剂和平衡试剂组成，所述显色剂由汞和1.42g/ml的浓硝酸按质量比例1:2.3‑2.6反应得到；所述缓冲试剂由磷酸氢二钠和柠檬酸组成的缓冲溶液，所述平衡试剂成分是磷钨酸溶液，以上各组成成分按体积比混合，得到该试剂。本发明该试剂用于恶性肿瘤筛查和辅助诊断时，取晨尿3ml，滴入本试剂0.6ml，摇匀、静置1‑3分钟，出现白色/黄色沉淀为阴性；出现红色沉淀者为阳性。本发明的一种快速检测尿液对羟基苯丙氨酸的检测试剂具有准确度高、特异性好等特点。

技术领域

本发明涉及一种快速检测尿液对羟基苯丙氨酸的检测试剂及其制备方法。

背景技术

尿液对羟基苯丙氨酸水平的显著提高，可以提示恶性疾病的发生。尿液对羟基苯丙氨酸检测试剂可以检测到临床前癌症患者尿液对羟基苯丙氨酸的含量，发现临床前的癌症对于肿瘤防治具有重要的意义。

通过对同类产品试剂应用对比研究发现，现有的检测试剂的化学灵敏度太高，作为定性检测试剂，检测结果的假阳性率太高，在临床应用上受到很大局限。

发明内容

本发明的目的就是提供准确度高、特异性好的一种快速检测尿液对羟基苯丙氨酸的检测试剂及其制备方法。

本发明的一种快速检测尿液对羟基苯丙氨酸的检测试剂，由显色剂、缓冲试剂和平衡试剂组成：

所述显色剂：显色剂的成分是汞离子、亚硝酸根离子和氢离子，它们在一个动态平衡的体系中存在，由汞和1.42g/ml的浓硝酸按质量比例1:2.3-2.6反应得到；

所述缓冲试剂：缓冲试剂由磷酸氢二钠和柠檬酸组成的缓冲溶液，其pH3.0-pH3.4；

所述平衡试剂：平衡试剂成分是磷钨酸溶液，它由以下方法制备：称取含钼0.005%的钨酸钠40g-42g，用蒸馏水350ml溶解，加入85%磷酸32-35ml，回流煮沸2小时，冷却至室温，加蒸馏水至1000ml，然后加入硫酸锂32g-35g；

最后，以上各组成成分按体积（ml）比混合，即显色剂：缓冲试剂：平衡试剂为1:1.75:0.25，摇匀，得到该试剂。

一种快速检测尿液对羟基苯丙氨酸的检测试剂临床检测应用：

该试剂用于恶性肿瘤筛查和辅助诊断时，取晨尿3ml，滴入本试剂0.6ml，摇匀、静置1-3分钟，出现白色/黄色沉淀为阴性；出现红色沉淀者为阳性。

本发明的一种快速检测尿液对羟基苯丙氨酸的检测试剂具有准确度高、特异性好等特点，通过检测各类已确诊的恶性肿瘤患者305例，阳性258例，阳性符合率84.6%；用本试剂筛查一般人群436例，阳性9例，阳性率为2.1%，特异性为97.9%；同时，用市场上同类试剂检测相同人群，得到阳性48例，阳性率为11%，特异性为89%。

具体实施方式

实施例1 ： 配制276ml一种快速检测尿液对羟基苯丙氨酸的检测试剂

1.显色剂：称取64g汞，溶解于比重1.42g/ml的硝酸106ml中，待汞完全溶解，量取得体积为92ml；

2.缓冲试剂：按比例配制161ml缓冲试剂PH3.0，量取0.2mol/L的磷酸氢二钠33.1ml，0.1mol/L的柠檬酸127.9ml，混合；

3.平衡试剂：称取含钼0.005%的钨酸钠40g，用蒸馏水350ml溶解，加入85%磷酸32ml，回流煮沸2小时，冷却至室温，加蒸馏水至1000ml，然后加入硫酸锂32g，从其中量取23ml；

将上述显色剂92ml、缓冲试剂161ml和平衡试剂23ml混合均匀即得到276ml的该试剂。

实施例2： 配制276ml一种快速检测尿液对羟基苯丙氨酸的检测试剂