[发明专利]一种快速检测心肌梗死蛋白和核算标记物的方法

说明书

一种快速检测心肌梗死蛋白和核算标记物的方法，其特征在于所述方法为用石墨烯化学镀银薄层制备电极，并对该电极同时对蛋白质标记物和核算进行检测,它具有制作过程更加简单，成本更低，可定性定量检测，重现性好，特异性高，使用寿命长，稳定性好的优点。

技术领域：

本发涉及一种快速检测心肌梗死蛋白和核算标记物的方法，属于有机物制造技术领域。

背景技术

心肌梗死(myocardial infarction, MI)是心血管疾病致死及致残的主要原因。我国每年约百万余患者死于急性心肌梗死(Acute myocardial infarction, AMI),该病被视为“人类健康第一杀手”。 AMI救治的关键是早期诊断,目前公认的最佳血清标志物肌钙蛋白也要在AMI后3.5小时才能检测到,为了进一步提高AMI的生存率和改善预后,我们需要寻求更早的诊断标志物。发生急性心肌梗死的病人，在临床上常有持久的胸骨后剧烈疼痛、发热、白细胞计数增高、血清心肌酶升高以及心电图反映心肌急性损伤、缺血和坏死的一系列特征性演变，并可出现心律失常、休克或心力衰竭。急性心肌梗死实质上就是心肌的缺血性坏死，其基本原因就是冠状动脉粥样硬化，逐渐发展至管腔狭窄甚至堵死，在此基础上突然发生血栓，导致冠状动脉完全阻死所致。急性心律失常、急性左心衰竭极易引起猝死，因此，救治越早，生存机会就越大，早抢救1小时甚至10分钟，都有可能使一个人的生命得到延续。

目前我国心肌梗死的诊断标准包括：临床诊断、心电图异常及蛋白标志物含量测定三项中的两项。但由于大约25%的心肌梗死病人发病早期没有典型的临床症状，约50%的病人心电图无典型变化，若单独依靠心电图改变和临床症状，心肌梗死的诊断符合率仅为75%。蛋白标志物测定具有特异性强、灵敏度高的优点。所以近年来，对于心肌梗死蛋白标志物的研究十分活跃。心肌梗死的蛋白标志物主要包括肌红蛋白、肌酸激酶同工酶和肌钙蛋白Ⅰ。

现有的蛋白标志物检测方法主要有酶联免疫法（ELISA）、免疫荧光法（IFA）和免疫胶体金法。ELISA和IFA具有特异性强、灵敏度高、重复性好的优点，但其操作程序复杂，只能在实验室进行；需要专业人员操作，用专门的仪器和设备，检测时间长，所需费用高。同时一次反应只能检测一个指标。免疫胶体金法测试简单快速、灵敏度高，成本低，且可以一次测试几种标志物。但其高灵敏度易导致假阳性结果，质量控制也不稳定。因此开发和使用联合检测以提高心肌梗死诊断的灵敏度和特异度以及阳性预测值是现实迫切需要解决的课题。微小核糖核酸(microRNA)是一种非编码RNA分子,调节细胞的生长、发育、分化及凋亡,在心血管疾病的发生发展中起到重要作用,最近研究也表明其在AMI后血浆中的浓度有显著变化,本文总结了最近的一些与AMI早期诊断有关的microRNA,并对microRNA作为新的AMI早期诊断标志物进行了展望。

发明内容：

为了解决上述问题，本发明提供一种生物传感器可以同进对上述蛋白标志物主要包括肌红蛋白、肌酸激酶同工酶和肌钙蛋白Ⅰ和微小核糖核酸进行检测。与以往那些技术相比，具有制作过程更加简单，成本更低，可定性定量检测，重现性好，特异性高，使用寿命长，稳定性好的优点，其快速检测心肌梗死蛋白和核算标记物的方法为用石墨烯化学镀银薄层制备电极，并对该电极同时对蛋白质标记物和核算进行检测。

其中所述石墨稀镀银薄层基础电极及引线的制备方法为：

（1）在普通载玻片上贴上一层PVC绝缘胶布，再在绝缘胶布上贴上一层预留基础电极及其引线和工作电极引线形状的掩膜，制成模板，用无水乙醇擦洗模板后，用蒸馏水冲洗干净，晾干，再放入1mol/L氢氧化钠溶液中浸泡10分钟，再用蒸馏水冲洗干净，晾干备用，以2%硝酸银溶液、5%氢氧化钠溶液、2%氨水、10%葡萄糖溶液和0.01%石墨稀悬浮液为反应液，在模板上进行重复银镜反应多次，制备石墨稀镀银薄层基础电极及引线，揭去掩膜，得到石墨稀镀银薄层基础电极及引线。

（2）把心肌梗死蛋白标记物为肌红蛋白、肌酸激酶同工酶和肌钙蛋白I抗体和微小核糖核酸分别包埋在（1）所制备的电极上。